一株产环糊精葡萄糖基转移酶的地衣芽孢杆菌的选育、产酶条件及酶学特性

摘要

从土壤分离物中筛选到一株环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)产生菌403,96h发酵酶活为0.95U/mL.经紫外辐射和硫酸二乙酯复合诱变而获得突变株CLS403,96h发酵酶活达1.36 U/mL,提高43%.该突变菌株被鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),产CGTase的最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为硝酸铵,最适初始pH为6.5,最适培养温度为35 ℃,发酵期间CGTase的产生高峰(第96h)滞后于菌体生物量高峰(第48h)2d.菌株所产CGTase的最适反应pH为6.0,最适温度为55℃,在pH 6.0～7.5间和50℃下保持1h后的剩余酶活均达90%以上;酶液中适量添加Ca2+能大幅提高CGTase在55℃下的稳定性.经高效液相色谱分析,CGTase作用于淀粉后的产物以α-环糊精为主,β-环糊精为次,二者比例为2.47:1,环糊精总产率达29.8%,但产物中不含γ-环糊精.