假单胞菌M18调控因子GacA与RsmA的相关性及对抗生物质合成代谢调控机制的分析

摘要

假单胞菌M18是一株可同时合成并分泌吩嗪-1-羧酸(Phenazine-1-carboxylic acid,PCA)和藤黄绿脓菌素(Pyoluteorin,Plt)两种抗生物质的生防菌株.为了进一步研究假单胞菌M18抗生物质合成代谢的调控方式与机制,在分别构建gacA、rsmA等单基因突变株基础上,又构建了gacArsmA双基因突变株M18GR以及gacA'-'lacZ和rsmA'-'lacZ等翻译融合表达载体(pMEGA和pMERA).通过在PPM和KMB两种培养基中发酵培养和两种抗生物质PCA和Plt的HPLC定量测定显示,双突变株M18GR的PCA和Plt的合成量不论在PPM还是在KMB培养基中都介于单突变株M18G和M18R之间.由实验结果分析推测,两种调控因子对抗生物质合成的调控作用不是发生在转录水平,很可能发生在转录后水平.由β-半乳糖苷酶的定量分析表明,在假单胞菌M18中,两种调控因子不存在自诱导机制;虽然GacA未调控RsmA的合成,但RsmA可能部分正向调控GacA的表达.