一株弗兰西斯菌的鉴定及其微生物学特性研究

摘要

【目的】对广州市某空调冷却水中分离的一株L-半氨酸刺激生长性细菌08HL01032进行分类学鉴定及微生物学特性研究。【方法】通过培养基生长状况、菌株形态、生理生化特性、PCR鉴定、16SRNA基因序列分析、RNA聚合酶β亚单位(rpoB)基因序列分析、动物实验、药敏实验等多种表型与基因相结合的方法,探讨该菌株的分类进化地位及一些基本的生物学特性。【结果】该菌株一些生理生化特征与军团菌十分相似,为革兰氏阴性杆菌,氧化酶阴性,不还原硝酸盐,不分解尿素,血平板缓慢生长、易忽略,酵母活性炭缓冲(BCYE)琼脂48h内生长良好,最初错误鉴定为军团菌。但16SrRNA基因(GenBank登陆号:FJ591095)、rpoB基因(GenBank登陆号:FJ939309)系统发育进化显示,该菌株为弗兰西斯(Francisella)属细菌,与蜃楼弗兰西斯菌(F.philomiragia)最相近,相似度分别为95.3%,87.3%,菌落形态、表型特征亦与弗兰西斯菌属相符。其最适生长温度在25℃～28℃之间,42℃不生长;能耐受pH2.2酸液10min;万古霉素、青霉素、多粘霉素B等耐药,军团菌甘氨酸-万古霉素-多粘霉素B-放线菌酮(GVPC)选择性添加剂无生长抑制作用;菌体无芽孢、无鞭毛动力,透射电镜下观察到荚膜样结构,但动物实验初步显示对小鼠无致病性。【结论】菌株08HL01032为弗兰西斯菌属一潜在的新种,其典型特征为L-半胱氨酸刺激生长性,不同于军团菌的L-半胱氨酸依赖性生长特性。