下调lncRNA KCNQ1OT1抑制H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞凋亡和氧化损伤

摘要

目的探讨下调长链非编码RNA(lncRNA)KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞凋亡和氧化损伤的影响。方法心肌细胞H9c2分成Control组、H_(2)O_(2)组(H_(2)O_(2)处理)、si-NC组(转染siRNA control,H_(2)O_(2)处理)、si-KCNQ1OT1组(转染KCNQ1OT1 siRNA,H_(2)O_(2)处理)、si-KCNQ1OT1+LiCl组(转染KCNQ1OT1 siRNA,Wnt信号激活剂LiCl和H_(2)O_(2)处理)。CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平、黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平、微量法检测过氧化氢酶(CAT)水平、比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,Western blot法检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-Caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(C-Caspase-9)、β-连环蛋白(β-catenin)、原癌基因(c-Myc)蛋白表达水平。结果与Control组比较,H_(2)O_(2)组心肌细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9、β-catenin、c-Myc蛋白表达水平升高,MDA水平升高,SOD、CAT、GSH-Px水平降低。与si-NC组比较,si-KCNQ1OT1组心肌细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9、β-catenin、c-Myc蛋白表达水平降低,MDA水平降低,SOD、CAT、GSH-Px水平升高。与si-KCNQ1OT1组比较,si-KCNQ1OT1+LiCl组心肌细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9、β-catenin、c-Myc蛋白表达水平升高,MDA水平升高,SOD、CAT、GSH-Px水平降低。结论下调KCNQ1OT1可以抑制H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞凋亡和氧化损伤,其机制与抑制Wnt信号通路有关。