极限稀释定量PCR法动态监测儿童急性淋巴细胞性白血病MRD

摘要

为探讨一种简便易行检测儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)微小残留白血病(MRD)的方法,应用Chelex100为介质抽提41例ALL患儿不同病期未染色骨髓涂片DNA,以TCR Va2 Da3基因重排为标志,采用极限稀释定量PCR法扩增,动态监测MRD的消长与临床病情变化的关系.结果发现:24例患儿在初诊时检出TCR V82Dδ 3基因重排(59%),灵敏度均为4个拷贝.经诱导缓解后,12例TCR Va2Dδ3基因重排仍为阳性,MRD值为2×10-6～1×10-3,其中7例MRD值于3～6个月内迅速下降转阴,骨髓检测未见复发,另5例MRD持续阳性或MRD持续高值,早期复发.骨髓检测复发患儿缓解期时MRD平均值为1.9×10-3明显高于同期骨髓检测未复发患儿的3×10-6(P<0.01).余12例诱导缓解后TCR Vδ2Da3基因重排转阴,MRD值均<1×10-6,其中3例MRD由阴性转阳后加强化疗力度,未复发.结果提示:以Chelex 100为介质抽提DNA进行PCR扩增,操作简便,敏感度高;动态监测MRD的消长对指导临床治疗,判断疗效和预知复发具有重要的临床意义.