肼屈嗪与丙戊酸对胆管癌细胞QBC939中P16、RASSF1A基因表达的协同作用

摘要

目的 探讨利用甲基化酶抑制剂(肼屈嗪)和组蛋白脱乙酰化酶抑制剂(丙戊酸)干预胆管癌细胞后,对P16和RASSFIA基因表达的影响.方法 将胆管癌细胞QBC939分为4组,丙戊酸组、肼屈嗪组、两药合用组以及空白组,分别以相应药物(终浓度10 mmol/L)作用48 h.空白组加入等量的含10%血清的RPMI 1640培养液.利用PCR、Westernblot和甲基化特异性PCR检测处理后的P16、RASSF1A基因及蛋白的表达和它们启动子区甲基化状态.结果 空白组P16基因及蛋白微量表达,RASSF1A基因及蛋白无表达;单用丙戊酸不能使两基因mRNA及蛋白表达增加,而单用肼屈嗪可以增加两基因mRNA及蛋白表达,两种药物合用使两基因mRNA及蛋白表达量明显高于单用一种药物组(均P<0.01);单用肼屈嗪、两药合用分别可使P16基因和RASSF1A基因启动子区部分和完全去甲基化,而单用丙戊酸无此效果.结论 两种药物在恢复沉默抑癌基因表达上有协同作用,有望成为胆管癌治疗的新选择.