甲型H1N1流感病毒感染年轻和老年C57BL/6小鼠诱导肺组织CD8+T细胞特异性免疫应答的比较研究

摘要

目的 比较甲型H1N1流感病毒PR8毒株感染老年和年轻C57BL/6小鼠诱导肺组织CD8+T细胞特异性免疫应答的能力.方法 使用490 PFU的PR8病毒分别滴鼻感染年轻(3月龄)和老年(24月龄)C57BL/6小鼠,连续14 d每日记录其体重变化及死亡情况.在感染后第8天分离小鼠肺组织细胞,使用流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)技术检测病毒抗原特异性CD8+T细胞数量及功能:MHC-I表位肽四聚体法(tetramer staining)染色流感特异性CD8+T细胞,细胞内细胞因子染色法(intracellular cytokine staining,ICS)检测CD8+T细胞经流感病毒特异性肽刺激后分泌细胞因子水平包括TNF-α、IFN-γ、IL-2以及与CD8+T细胞杀伤功能有关的颗粒酶B(Granzyme B)的水平.结果 相同量的PR8流感病毒感染小鼠后,老年小鼠体重下降更多,死亡率显著高于年轻小鼠(P<0.01).另一方面,老年组小鼠诱生的病毒特异性CD8+T细胞比例显著低于年轻组;同时,老年组CD8+T细胞活化后分泌细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2的水平显著低于年轻组;此外,老年组CD8+T细胞表达granzyme B的水平同样显著低于年轻组.结论 PR8流感病毒感染老年和年轻C57BL/6小鼠后,老年小鼠肺组织诱导产生的特异性CD8+T细胞的数量减少且功能降低.结果 表明:与年轻小鼠相比,老年小鼠肺组织CD8+T细胞特异性免疫应答功能受损.