SD大鼠体外受精与早期胚胎体外培养体系的初步建立

摘要

目的改造IVF-30和HTFplus培养液,观察在改造后培养液里卵的受精和早期胚胎的发育状况,寻找适合SD大鼠体外受精和早期胚胎培养的实验体系.方法采用两种方法(超数排卵及体内成熟)采集成熟卵母细胞用于体外受精.选择两种商品化的培养液IVF-30(Vitrolife),HTFplus(Lifeglobal).分别在以上的培养基中增加10、20、30 mmol/L的NaCl,将培养液的渗透压提升至325～355 mOsM之间,观察在改造前与改造后的培养液内SD大鼠卵母细胞受精率和囊胚发育率等指标.结果经改造的培养液HTFplus和IVF-30,体外受精率分别从13%、15%提升至70%、67%.改造后的IVF-30和HTFplus的2细胞,大于4细胞及囊胚的发育率分别为85%,74%,22%;96%,75%,32%.HTFplus,IVF-30经过改造后更适合于SD大鼠的体外受精及早期胚胎培养.与超排相比较更多的在自然周期的体内成熟卵母细胞(16%,28%)发育到了囊胚.结论成功建立了SD大鼠的体外受精和体外培养系统.