miR-202-5p在牙鲆性腺中的表达分析及其与cbx2靶向关系验证

摘要

为研究miR-202-5p在鱼类中作用的靶基因及功能,采用荧光定量PCR和原位杂交技术构建了miR-202-5p在牙鲆(Paralichthys olivaceus)不同组织和雌雄性腺中的表达谱.定量结果发现,miR-202-5p在牙鲆性腺中具有特异性的高表达,且在精巢中的表达水平高于卵巢.原位杂交结果显示,miR-202-5p主要在精巢的精原细胞和精母细胞中表达,而仅在卵巢的Ⅳ和Ⅴ期卵母细胞中有较强烈表达.研究发现色素框同源蛋白2(Chromobox homolog 2,CBX2)在性腺发育中具有重要调节作用,为进一步研究miR-202-5p在牙鲆性腺发育中的功能,采用生物信息学方法预测和双荧光素酶报告基因技术鉴定了二者的靶向关系,结果证实,cbx2为miR-202-5p直接调节的靶基因,为深入阐述miR-202-5p在牙鲆性腺发育中的作用机制提供了基础.