二化性家蚕滞育、非滞育和即时浸酸卵中糖代谢相关酶mRNA水平和活性的变化

摘要

[目的]探究家蚕Bombyxmori胚胎发育早期卵内糖代谢与滞育的关系.[方法]以家蚕二化性品种"秋丰"活化越年卵为材料,一部分于17°C暗催青,孵化后常规饲养,制备非滞育命运卵(ND);另一部分于25°C明催青,孵化后常规饲养,制备滞育命运卵(DD),再用盐酸溶液处理部分DD卵制备即时浸酸卵(IA).在卵产下或浸酸后0,2,6,12,24,48,72和96 h分别取样,利用qRT-PCR测定家蚕卵中己糖激酶(hexokinase,HK)、磷酸果糖激酶(phosphofructokinase,PFK)、山梨醇脱氢酶(sorbitol dehydrogenase,SDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)和海藻糖酶(trehalase,TRE)5种糖代谢相关酶基因的mRNA表达水平,利用紫外-可见分光光度法测定家蚕卵中这5种酶的活性.[结果]家蚕糖酵解途径关键酶己糖激酶(BmHK)和磷酸果糖激酶(BmPFK),以及糖分解代谢关键酶山梨醇脱氢酶(BmSDH-1)和海藻糖酶(BmTRE)在ND和IA中的mRNA水平和活性均普遍高于在DD中的;而糖异生途径相关的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(BmPEPCK)在DD中的mRNA水平和活性均高于在ND和IA中的.[结论]结果提示,DD因胚胎滞育的需要,胚胎发育早期卵内糖代谢以能量和物质的贮存为主;而ND和IA由于胚胎发育进程较快,糖代谢以物质分解代谢为主.本研究初步揭示了家蚕卵内糖代谢与滞育的关系,有助于更好地理解家蚕滞育的分子机制.