基于改良石蜡切片技术的飞蝗胚胎浆膜表皮发育模式及形态变化观察

摘要

[目的]通过优化飞蝗Locusta migratoria胚胎石蜡切片制备技术,研究飞蝗胚胎发育时期浆膜表皮变化规律.[方法]通过优化飞蝗胚胎固定前处理、洗涤、脱水和透明等步骤,改良胚胎期石蜡切片制备技术;制备飞蝗胚胎发育第3-10天的石蜡切片,通过HE染色观察浆膜表皮发育规律;通过制备飞蝗发育第6-8天从卵孔端至卵尾端的纵切切片,观察飞蝗胚胎转旋时期的形态变化.[结果]飞蝗胚胎期石蜡切片技术优化后的操作步骤为:固定前NaClO预处理和打孔、洗涤30min、脱水30 min和透明30 min.通过此方法可获得表皮结构完整且清晰的胚胎期组织切片.在30℃条件下,飞蝗胚胎浆膜表皮及几丁质沉积形成于胚胎发育的第5天,在第8天时开始降解.飞蝗胚胎的转旋发生在第6-7天,伴随着浆膜和浆膜表皮的形态变化.[结论]本研究优化了飞蝗胚胎石蜡切片制备步骤,揭示了飞蝗胚胎浆膜表皮及胚胎转旋的发育模式,为昆虫胚胎发育的研究提供了基础资料.