肺岩宁方对Lewis肺癌小鼠肿瘤浸润性髓样细胞的调控作用研究

摘要

目的:观察肺岩宁方对Lewis肺癌小鼠肿瘤浸润性髓样细胞MDSCs、TAMs的调控作用.方法:选取C57 BL/6雄性小鼠建立Lewis肺癌小鼠模型,成模小鼠随机分为模型组、肺岩宁低剂量组、肺岩宁高剂量组,每组8只,另取8只正常小鼠为空白组.空白组、模型组:0.4 mL生理盐水灌胃,每日1次;肺岩宁低剂量组:0.4 mL 40 g/(kg·d)肺岩宁方灌胃,每日1次;肺岩宁高剂量组:0.4 mL 80 g/(kg·d)肺岩宁方灌胃,每日1次.14 d后处死小鼠,剥取肺组织,收集外周血,流式细胞术检测小鼠肺组织MD-SCs、M1及M2型TAMs细胞百分比;酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠外周血IL-4、IL-10表达水平;实时荧光PCR法检测小鼠肺组织中iNOS、Arg-1 mRNA表达水平;免疫印迹法(Western Blot)检测小鼠肺组织PD-1、PD-L1、PI3 K、C/EBPβ表达水平.结果:与空白组相比,模型组小鼠肺组织中M1型TAMs百分比显著降低(P<0.05),M2型TAMs、MDSCs百分比显著上升(P<0.05);与模型组相比,肺岩宁低、高剂量组小鼠肺组织中M1型TAMs细胞百分比显著上升(P<0.05),M2型TAMs、MDSCs百分比显著降低(P<0.05).与空白组相比,模型组、肺岩宁低、高剂量组小鼠血清中IL-4、IL-10水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,肺岩宁低、高剂量组小鼠血清中IL-4、IL-10水平显著降低(P<0.05);与肺岩宁低剂量组相比,高剂量组小鼠血清中IL-4、IL-10水平显著降低(P<0.05).与空白组相比,模型组小鼠肺组织中iNOS mRNA水平显著降低,Arg-1 mRNA水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,肺岩宁低、高剂量组小鼠肺组织中iNOS mRNA水平上升,Arg-1 mRNA水平显著降低(P<0.05).与空白组相比,模型组、肺岩宁低剂量组小鼠肺组织中PD-1、PD-L1、PI3 K表达增加(P<0.05),模型组小鼠肺组织中C/EBPβ 表达增加(P<0.05);与模型组相比,肺岩宁高剂量组小鼠肺组织中PD-1、PD-L1、PI3 K、C/EBPβ表达下调(P<0.05),肺岩宁低剂量组小鼠肺组织中PD-L1表达下调(P<0.05);与肺岩宁低剂量组相比,肺岩宁高剂量组小鼠肺组织中PD-L1表达下调(P<0.05).结论:肺岩宁方具有抑制肺癌组织中肿瘤浸润性髓样细胞MDSCs、M2型TAMs增殖,促使TAMs表型向M1型转变,同时调控MDSCs、TAMs功能蛋白iNOS、Arg-1的合成,下调免疫负向调节因子IL-4、IL-10水平的作用,其内在机制可能通过抑制PD-1/PD-L1、PI3 K/C/EBPβ信号通路,发挥改善肿瘤免疫抑制,重塑肿瘤免疫微环境的作用.