LC-MS/MS法测定东北黄精灌胃后大鼠血浆中3种皂苷类化合物含量及其药代动力学研究

摘要

目的:采用LC-MS/MS法测定中药黄精灌胃后大鼠血浆中人参皂苷Rb1、薯蓣皂苷和菝葜皂苷元的含量,并将此方法应用于大鼠口服东北黄精后皂苷类化合物的代谢动力学研究.方法:采用96孔板进行大鼠血浆生物样品提取,提高样品的处理效率,以A甲醇-B 0.1％甲酸溶液(70:30)为流动相进行等度洗脱,在正离子模式下进行检测,采用多级反应检测(Multiple Reaction Monitoring,MRM)法.用于定量分析的离子反应对分别为m/z 1131.6→365.7(人参皂苷Rb1)、m/z 890.5→721.3(薯蓣皂苷)、m/z 439.7→417.6(菝葜皂苷元)、m/z 491.5→425.3(甘草次酸,内标).结果:3种皂苷化合物的大鼠血浆样品测定方法的定量范围为5～220 ng/mL,线性相关系数r>0.999,精密度RSD<8.8％,回收率为82.34％ ～89.41％,基质效应为90.23％ ～91.34％.黄精灌胃后大鼠血浆中人参皂苷Rb1、薯蓣皂苷、菝葜皂苷元的达峰时间tmax分别为(2.03±0.32)h、(1.91±0.54)h、(1.16±0.19)h,半衰期t1/2分别为(8.57±0.53)h、(7.34±0.68)h、(6.85±0.52)h,最大血药浓度Cmax分别为(90.37±21.08)ng/mL、(55.21±20.12)ng/mL、(136.27±39.05)ng/mL,药时曲线下面积AUC0～24分别为(1095.83±87.36)(ng·h)/mL、(735.65±64.36)(ng·h)/mL、(1648.96±103.26)(ng·h)/mL.结论:该方法高效、快速、灵敏,适用于中药黄精灌胃后大鼠血浆中3种皂苷类物质的药代动力学研究,本研究方法及结果将为东北黄精体内作用物质基础研究及临床应用提供重要参考.