尖吻蝮蛇毒磷脂酶A2基因的克隆与序列分析

摘要

从尖吻蝮蛇毒腺中抽提总RNA,经RT-PCR扩增磷脂酶A2的基因,以江浙蝮蛇的酸性磷脂酶A2基因为探针杂交筛选克隆,分离得到4种磷脂酶A2基因.经双向测序测定了这些磷脂酶A2同功酶基因的全序列,并由此推导出编码的氨基酸序列.运用计算机软件推算了它们的等电点,按照等电点和结构特征将它们分别命名为尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶A2I(A.aAPLA2I)、尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶A2II(A.aAPLA2II)、尖吻蝮蛇毒碱性磷脂酶A2(A.aBPLA2)和尖吻蝮蛇毒Lys49-磷脂酶A2(A.aLys49-PLA2).其中A.aAPLA2I的1～10位氨基酸残基序列同以前分离得到的尖吻蝮蛇酸性磷脂酶A2已测定的1～10位氨基酸残基序列完全一致.A.aLys49-PLA2基因则由于其推导出的49位氨基酸残基由Lys代替了Asp而区别于以前克隆到的磷脂酶A2基因.最后运用计算机软件比较了它们的同源性.这一组磷脂酶A2基因的克隆,将为进一步研究磷脂酶A2的结构与功能的关系提供更多的信息.