棉花arf1启动子驱动Cry1A基因在烟草中特异性表达研究

摘要

在新一代Bt作物以及Bt作物安全性研究方面,Bt毒蛋白在植物特定发育阶段的表达特性渐受关注.本研究构建了植物表达载体pGBI121.A1Bt,其携带棉花arf1启动子驱动Cry1A基因的表达盒,启动子后面有一个Ω序列;对照载体pGBI121.4AB携带P2E35S启动子(增强子加倍的修饰CaMV 35S启动子)驱动Cry1A基因的表达盒,在启动子后面也有一个Ω序列.利用根癌农杆菌介导法,将植物表达载体pGBI121.4AB和pGBI121.A1Bt转化烟草,分别获得44株和42株转基因烟草再生植株.ELISA检测表明,在pGBI121.AlBt转基因烟草的蒴果、蒴果壳、花瓣和叶中Cry1A基因的平均表达水平分别为pGBI121.4AB的1.5、1.5、1.4和0.3倍.棉花arf1启动子在烟草中表达,证明了该启动子在植物生殖器官中具有优势表达特性,为arf1启动子应用于转基因抗虫棉,在棉花蕾铃中优势表达Bt毒蛋白,提高转基因棉花蕾铃抗虫性的新一代抗虫棉研究提供了依据.