RT-PCR检测甜菜坏死黄脉病毒及总RNA提取方法研究

摘要

为选择较为适合甜菜总RNA的提取方法,构建和优化RT有效体系.以田间甜菜叶片、根毛及根表皮为材料,研究了提取甜菜总RNA的方法以及利用RT-PCR技术进行甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)的检测.研究表明,获得良好的RT-PCR扩增效果,RT体系中dNTPs浓度、引物、AMV、模板RNA的浓度要分别达到1 mmol/L,1 μmol/L,0.1 U/μL,0.01 μg/μL较好.PCR体系中dNTPs浓度、引物、TaqDNA聚合酶、Mg2+的浓度要分别达到0.1 mmol/L,0.1 μmol/L,0.01 U/μL,1.48 mmol/L效果较好.RT-PCR法对BNYVV检测,可作为甜菜品种(育种材料)早期抗丛根病性鉴定的依据之一.