人基质蛋白酶2(MMP-2)类血红素结构域原核表达优化

摘要

用构建的人基质蛋白酶-2(MMP-2)类血红素结构域原核表达载体PET25b-PEX转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性菌落LB液体培养基培养,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达产生的表达蛋白,大小约29 kD,与预期大小相符.设置不同的IPTG诱导终浓度,诱导时间,诱导时菌液OD值和LB液体培养基的pH值,SDS-PAGE电泳和软件分析发现,当IPTG浓度为0.7 mmol/L,诱导4 h,诱导时菌液OD值为0.7时,实验能获得最高的PEX蛋白表达;5 L大规模培养时,LB培养基pH值为7.5时,可获得较高的重组PEX蛋白表达.