新基因p7TP3剪切体1的克隆与亚细胞定位

摘要

利用RT-PCR技术扩增丙型肝炎病毒p7蛋白反式调节基因3剪切体1(p7TP3剪切体1)开放阅读框序列.将目的基因片段插入pGEM-T载体中,经双酶切和测序鉴定后,定向克隆至荧光表达载体pEGFP-C1,EcoR I及BamH I双酶切鉴定.脂质体法转染HepG2细胞,荧光显微镜下观察确定其亚细胞定位.结果表明,p7TP3剪切体1片断长度为381 bp,与预期结果一致;亚细胞定位结果表明,该蛋白定位于细胞浆中.