生物素标记cDNA探针检测苹果锈果类病毒

摘要

以含苹果锈果类病毒(ASSVd)全长序列的重组质粒PUC为模板DNA,加入ASSVd类病毒特异性引物,应用聚合酶链式反应技术(PCR)合成了生物素标记的cDNA探针,在斑点杂交反应中,探针最适使用浓度为1/10,探针检测感病的ASSVd类病毒的最大稀释倍数是1/100.利用制备的探针进行田间检测,结果与RT-PCR检测结果一致,阴性对照均无杂交信号出现.