两步多重PCR技术快速检测杜氏肌营养不良基因缺失

摘要

杜氏肌营养不良（Duchenne muscular dystrophy,DMD）是男性最常见的X连锁致死性遗传病之一,临床上较轻型的BMD（Becker muscular dystrophy）是其等位基因型。DMD和BMD的发病率分别为30/10万和3/10万。三分之一的新生男婴患者由新生突变所引起。DMD基因定位于Xp23,是已知的最大基因,约有2300kb。由于该基因太大,用传统的限制性内切酶片段长度多态性（RFLPs）进行家系连锁分析,或应用cDNA探针进行Southern印迹杂交检测基因缺失均较繁琐费时,在临床上不易推广。PCR技术自1985年问世以来,已广泛应用于遗传病的基因诊断。Chamberlain等在DMD基因的两个缺失热点内,以9个易缺失外显子的旁侧顺序为引物进行多重PCR扩增,快速检测出DMD基因的绝大部分缺失型。本实验参照其多重PCR合成9对引物,并选用缺失率较高的5对引物和另外4对引物进行两步多重PCR,对中国人群中的DMD患者进行筛查,获得满意结果。