吗啡长时程作用对SH-SY5Y细胞cAMP系统及c-Fos磷酸化的影响

摘要

目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ 及ｃＦｏｓ 的变化。结果　（１） １００μｍ ｏｌ／Ｌ吗啡作用２ ｍ ｉｎ～３６ ｈ 可使ＳＨＳＹ５Ｙ细胞ｃＡＭＰ水平呈双相变化：短时作用下ｃＡＭＰ水平降低，随着吗啡作用时间的延长，ｃＡＭＰ水平逐渐回升，至３６ ｈ 时明显高于对照，这时加入１００ μｍ ｏｌ／Ｌ纳洛酮可诱发ｃＡＭＰ水平的反弹性超高现象。表明吗啡作用３６ ｈ 可使分化的ＳＨＳＹ５Ｙ细胞产生类吗啡依赖样变化；（２） 吗啡长时作用下，胞质可溶相ＰＫＡ活性也呈双相变化，而膜相ＰＫＡ 活性未见明显变化；（３）吗啡作用３６ ｈ 时，细胞ｃＦｏｓ磷酸化水平显著降低，ＰＫＡ抑制剂可抑制此作用；（４）纳洛酮可抑制上述ＰＫＡ 活性及ｃＦｏｓ 磷酸化水平的改变。结论　ＳＨＳＹ５Ｙ 细胞ｃＡＭＰＰＫＡ 系统的上调可能与吗啡依赖的形成有关，而且在吗啡依赖样细胞中ＰＫＡ可能通过磷酸酶而使细胞ｃＦｏｓ 发生去磷酸化，从而激活某些基因的转录。