miR-9靶向调控跨膜蛋白16A基因对胶质瘤T98G细胞增殖和侵袭的影响

摘要

目的 探讨miR-9和跨膜蛋白16A(transmembrane protein 16,TMEM 16A)基因在胶质瘤T98G细胞中的表达,阐明miR-9对TMEM16A基因的靶向作用及其对T98G细胞增殖和侵袭的影响.方法 运用生物信息学方法对miR-9和TMEM16A基因的靶向配对关系进行预测,采用荧光素酶报告系统鉴定;脂质体2000转染miR-9模拟物及干扰RNA后,Real-time PCR检测miR-9与TMEM16A mRNA在癌细胞中的表达,Western blot检测TMEM16A蛋白在癌细胞中的表达,平板克隆形成实验检测癌细胞的增殖情况以及Transwell小室检测癌细胞体外的侵袭性.结果 生物信息学软件TargetScan和miRanda显示miR-9与TMEM16A基因靶向配对良好,荧光素酶报告系统鉴定发现miR-9能够抑制TMEM 16A mRNA表达.Real-time PCR和Western blot检测结果均表明过表达miR-9能够降低TMEM16A mRNA和蛋白的表达.平板克隆形成实验和Transwell实验发现过表达miR-9能够分别抑制T98G细胞的增殖和侵袭.结论 miR-9通过负性调控胶质瘤T98G细胞中TMEM16A基因的表达抑制癌细胞的增殖和侵袭.