一、前言
二、材料和方法
(一)材料
1.菌株和载体
2.真核细胞系
3.修饰酶及限制性内切酶
4.其它主要试剂
5.放射性核素
6.主要仪器设备
(二)实验方法
1.实验技术路线
2.细胞培养、复苏、诱导与联苯胺染色
3.MEL细胞总RNA的提取（TRIZOL）
4.代表cDNA片段分子库的制备
5.差异PCR
6.差示带的回收、再扩增及纯化
7.差异cDNA片段的克隆
8.反向Northern斑点杂交
9.阳性克隆的序列测定及同源性分析
10.Northern杂交鉴定差异性
11.RACE
三、实验结果
(一)联苯胺染色检测药物诱导MEL细胞分化的状况
(二)细胞总RNA的质量鉴定
(三)差异PCR
1.寡核苷酸的质量鉴定
2.差异PCR模板的富集
3.差异PCR
4.差示带的切取、回收和再扩增
5.差异cDNA片段的克隆
6.差异cDNA片段的测序及同源性分析
(四)差异cDNA片段的差异性鉴定
1.反向Northern斑点杂交分析
2.Northern杂交分析确定差异cDNA片段的差异性：
(五)3’及5’RACE
1.RACE特异引物的纯化
2.3’及5’RACE
3.Southern杂交
4.RACE产物测序
(六)部分长片段cDNA的序列分析
1.51#克隆
2.35#RACE产物
四、讨论
五、小结
六、参考文献
七、文献综述
八、英文名词及缩写：
九、致谢
十、附录:
