肌酐酶纯化、性质研究及血清肌酐酶法分析的初步建立

摘要

目的:对肌酐酶(EC3.5.2.10)产酶菌株的培养,产酶条件,酶的纯化及酶学性质作较为全面的研究.同时对肌酐酶法分析的建立进行了初步的探讨和研究.结果:分子筛凝胶法测得肌酐酶的分子量为163000;以肌酸以为底物时的Km值为0.12M;最适pH值为6.75-7.75;最适反应温度为60℃;肌酐酶在50℃以下较为稳定;2mM的巯基乙醇和50﹪的甘油对该酶有很好的保护作用.在酶偶联反应体系中,选择pH8.0,100mmol/L的甘氨酸作为缓冲液;肌酐酶,肌酸激酶,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶的最适反应浓度分别为:5μ/ml,10μ/ml,4μ/ml,10μ/ml;以分析纯的肌酐配制成标准液,在紫外分光光度仪上手工测定表明该酶法在25-600μmol/L肌酐浓度范围内有很好的线性关系,与苦味酸法的对比实验结果也表明二者有很好的相关性.

目录

摘要

Ab stract

前言

肌酐酶纯化及性质研究

实验材料

实验方法和结果

乳酸脱氢酶的纯化

肌酐酶法分析的初步建立

讨论

论文综述

参考文献

致谢