新氟喹诺酮类抗生素昌欣沙星的药效学研究

摘要

喹诺酮类抗生素作为目前我国临床治疗感染性疾病的重要药物之一,具有抗菌谱广、抗菌活性强、药代动力学特性好等特点,尤其氟喹诺酮类抗生素具有更大的优势。从喹诺酮类抗生素发现至今,已有数十种新喹诺酮类化合物进入临床,当前广泛使用的环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星等是临床抗感染不可或缺的药物。昌欣沙星是由我国自主研发的1.1类新氟喹诺酮类抗生素,是由莫西沙星进行结构改造,将8位二氟甲氧基取代甲氧基而得,具有良好的体内外广谱抗菌活性。
　　 本论文第一部分研究了昌欣沙星的体外药效学,包括对1754株临床分离菌的MIC分布、MBC、KCs、抗菌活性影响因素、细胞毒性和对DNA回旋酶和拓扑异构酶Ⅳ的抑制试验。结果表明,昌欣沙星对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有较强的广谱抗菌活性,对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌具有非常强的抗菌活性,MIC90分别为0.25μg/mL、0.03μg/mL,与莫西沙星相当或稍强,对金葡菌、表葡菌、化脓链球菌、粪肠球菌、肺炎克雷伯杆菌的MIC50为0.06～0.5μg/mL之间,显示出良好的活性。昌欣沙星对临床耐药菌仍有较好的抗菌活性,对MRSA、CR-MRSA、MRSE、CR-MRSE、PISP、PRSP等的MIC50为0.125～4μg/mL之间,对产ESBL的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的活性稍弱,但仍与莫西沙星相当。昌欣沙星对金葡菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌的敏感率较高,分别为52.3％、97.8％、100％和86.5％,具有较好的临床使用前景。MBC试验和杀菌曲线试验结果表明,昌欣沙星对金葡菌、化脓链球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌是一种有效的杀菌剂,对金葡菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌的杀菌效果呈现明显的浓度依赖关系,对化脓链球菌呈现时间依赖关系,有待于进一步研究。影响因素试验表明,培养基pH值、细菌接种量、血清浓度等对昌欣沙星的抗菌活性无明显影响。
　　 细胞毒性试验结果表明,昌欣沙星对人肺腺癌A549细胞毒性较小,IC50为551.04μg/mL(大于1000μM),与莫西沙星等其他临床常用喹诺酮类化合物相当。
　　 昌欣沙星对喹诺酮类靶点DNA回旋酶和拓扑异构酶Ⅳ的抑制试验表明,昌欣沙星对DNA回旋酶的促旋活性抑制的IC50为1.05μM,稍弱于莫西沙星,但与环丙沙星相当；对拓扑异构酶Ⅳ的解离活性抑制的IC50为2.25μM,弱于莫西沙星和环丙沙星；松弛活性抑制的IC50为0.79μM,强于莫西沙星和环丙沙星。
　　 此外,为更深入的研究昌欣沙星的药效学,克隆表达了金葡菌中喹诺酮类抗生素的靶点之一的拓扑异构酶Ⅳ,为进一步研究昌欣沙星的作用机制打下了基础。
　　 本论文第二部分研究了昌欣沙星的体内药效学。在小鼠全身感染模型中,昌欣沙星口服给药与莫西沙星口服给药治疗效果相当,对革兰氏阳性菌优于左氧氟沙星,对革兰氏阴性菌弱于左氧氟沙星。其中对金葡菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌杆菌引起的全身感染具有较好的治疗效果,ED50为1.25 mg/kg至8.28 mg/kg；对粪肠球菌引起的全身感染治疗效果稍差,ED50为25.02 mg/Kg。
　　 同时,研究了昌欣沙星在小鼠体内的药代动力学特点,通过计算昌欣沙星5 mg/kg口服给药后小鼠体内的药代动力学参数,得到昌欣沙星在小鼠体内的Cmax为1085μg/mL,半衰期为1.425h,AUC0-24h为1101.31h*ng/mL。根据体外药效学MIC数据计算获得金葡菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯杆菌、流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌的Cmax/MIC50分别为18.08、8.68、4.34、135.625、31.17,化脓链球菌的T>MIC为2.03h。试验结果说明昌欣沙星具有良好的药代动力学特征,进一步说明昌欣沙星具有良好的体内抗菌能力。