组合性标记物在鉴别肺原发腺癌与转移性乳腺癌中的应用

摘要

[目的]
　　评价多个乳腺癌或肺腺癌特异性分子标记物对肺内转移性乳腺癌的诊断意义，探讨组合型分子标记物在乳腺癌患者继发肺癌的病理学诊断和鉴别诊断中的应用价值;并探讨乳腺癌患者继发肺癌的临床诊治特征。
　　[方法]
　　(1)采用多组病例对照研究方法，选取我院存档石蜡标本321例(包括肺内转移性乳腺癌41例、肺内非乳腺源性转移性腺癌33例、原发肺癌52例、原发乳腺癌35例以及女性常见其它部位腺癌160例)，采用组织芯片结合免疫组织化学方法检测乳腺珠蛋白(Mammoglobin，MGB1)、大囊泡病液体蛋白-15(Gross cystic disease fluid protein-15，GCDFP-15)、雌激素受体(Estrogen receptor，ER)、孕激素受体(Progesterone receptor，PR)、甲状腺转录因子(Thyroid transcription factor-1,TTF-1)、肺泡表面活性蛋白A(Surfactant protein A，SP-A)和肺泡表面活性蛋白B(Surfactant protein B，SP-B)、天冬氨酸蛋白酶A(Napsin A)等八种标记物在上述各组病例中的表达情况，以现有形态学诊断标准为参照，采用卡方检验及受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)的比较，观察并筛选一组兼具特异性和敏感性的抗体组合，用于鉴别乳腺癌患者继发肺癌到底是转移性乳腺癌还是肺原发癌。
　　(2)采用实时荧光定量PCR方法，选取我院新近经病理确诊的原发乳腺癌和肺癌各51和48例，检测文献报道的乳腺癌中高表达的基因亲脂素B(lipophilinB，又称BU101)和小粘蛋白样基因(BS106)在上述乳腺癌和肺癌中的表达，并用秩和检验比较它们在两组病例中的表达有否统计学差异。
　　(3)回顾性分析我院经治的55例乳腺癌继发“肺癌”病例，将其分为肺内转移性乳腺癌和肺原发癌两组，采用卡方检验比较两组间的部分临床病理特征并汇报其中的特殊病例，为乳腺癌继发肺癌患者的个体化治疗积累经验。
　　[结果]
　　(1) TTF-1、Napsin A、SP-A、SP-B在肺腺癌中的阳性率分别为84.6％、82.7％、69.2％、46.2％，而在其它部位腺癌(包括乳腺癌)及肺内非乳腺来源的转移性腺癌中呈阴性表达;MGB1、GCDFP-15在乳腺癌中阳性率分别为62.9％和42.9％，在肺腺癌中呈阴性表达，并且显著高于其它部位腺癌(p＜0.05);ER、PR在乳腺癌中表达显著高于肺腺癌(88.6％ vs.2.6％;71.4％ vs.2.6％; p＜0.05)。各标记物对肺内原发腺癌的诊断指数(即特异性和敏感性之和)依次为TTF-1＞Napsin A＞SP-A＞ SP-B，对原发乳腺癌的诊断指数依次为ER＞MGB1＞ GCDFP-15＞PR。
　　55例乳腺癌患者继发“肺癌”中47例呈TTF-1、Napsin A、SP-A、SP-B或MGB1、GCDFP-15、ER、PR阳性表达。绘制上述指标的鉴别诊断相关ROC曲线并比较曲线下面积，结果显示:SP-A、SP-B、NapsinA和TTF-1鉴别肺原发腺癌的ROC曲线下面积均＞0.8，显著大于标准参考线(AUC=0.5)(p＜0.05);但ER、PR、MGB1和GCDFP-15单独使用对肺内转移性乳腺癌的鉴别能力(AUC值)稍弱，各AUC值介于0.7和0.8之间，但均显著大于标准参考线(AUC=0.5)(p＜0.05)。将上述两组指标分别进行串联和并联试验，列出不同组合情况下的交叉表直观观察，并进行组间卡方检验，结果发现两两组合较单一指标效能高(p＜0.05)，并与三三组合和四四组合无显著差异(p＞0.05)。分析乳腺癌病史组47例阳性病例发现，支持肺原发腺癌的四个指标TTF-1、Napsin A、SP-A、SP-B中，“TTF-1或SP-B(+)”或者“Napsin A或SP-B(+)”两个组合对肺原发腺癌的诊断指数高于其它几种指标组合，其敏感性和特异性分别高达90.9％和100％。同理，在乳腺癌中高表达的四个指标MGB1、GCDFP-15、ER和PR中，“MGB1或ER”阳性对肺内转移性乳腺癌的诊断指数明显高于其它几种组合，其敏感度和特异度分别为91.7％和81.8％。将MGB1、ER、SP-B、TTF-1(或NapsinA)四个指标组合鉴别肺内转移性乳腺癌的敏感度为91.7％，特异度为81.8％，曲线下面积为0.941，显著大于标准参考线(AUC=0.5)和其它组合类型(p＜0.05)。
　　(2)QRT-PCR方法检测BU101和BS106基因在51例原发乳腺癌中的表达显著高于48例原发肺癌(秩和检验，p＜0.05)。
　　(3)55例乳腺癌患者继发肺癌的部分临床病理特征分析表明，肺内转移性乳腺癌和肺原发癌两组病例在乳腺癌病史长短、肺内结节数量、有无胸部放疗史、手术方式(肿物或楔形切除vs.肺叶切除)等方面均无显著差异(卡方检验，p＞0.05)。另从其中两个特殊病例中可见，乳腺癌患者继发肺癌应当具体问题具体分析，尽可能实施个体化诊疗方案。
　　[结论]
　　1.组合性指标(MGB1+ER+ SP-B+TTF-1(或NapsinA))能够较有效地鉴别绝大多数肺内转移性乳腺癌和肺原发腺癌，可作为乳腺癌患者继发肺癌形态不典型时的辅助鉴别手段，并为此类患者提供临床分期和个体化治疗相关的临床病理依据。
　　2.BS106和BU101基因在乳腺癌中的表达显著高于肺癌，可望成为鉴别肺内转移性乳腺癌的分子指标。尚待研究上述基因相应的蛋白标记物，进一步评价其对肺内转移性乳腺癌的鉴别诊断能力。
　　3.乳腺癌病史长短和肺内继发结节多少以及有无放疗史都不能单一作为鉴别肺内转移性乳腺癌的诊断要点，需要具体问题具体分析。从两个特殊病例汇报中，我们体会到术中冰冻及术后大体观察、充分取材及详尽的术后病理报告对肺肿瘤及乳腺原发癌的临床病理分期非常重要，有助于个体化诊疗，改善患者预后。

目录

表索引

图索引

中英文缩略词

摘要

前言

第一部分 组合性抗体鉴别肺内转移性乳腺癌的应用研究

研究背景

资料和方法

实验质量控制

实验结果

讨论

第二部分 BU101和BS106基因在肺癌和乳腺癌中的表达差异

研究背景

资料和方法

实验结果

讨论

第三部分 乳腺癌患者继发肺癌55例诊治分析

研究背景

资料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

文献综述 乳腺癌肺转移的病理学鉴别诊断研究进展

课题资助及发表论文、参加学术会议

个人简历

杨琳同学攻读临床博士学位培养计划

致谢

声明