逆流色谱法分离五味子中的木脂素

摘要

五味子为五味子科植物Schisandra chinesis(Turcz.)Baill的干燥成熟果实，是我国传统的中药。在我国的东北(黑龙江、吉林、辽宁)广泛种植，作为一种著名中药载入药典。五味子的活性成分多为木脂素类，包括五味子甲素、五味子乙素、五味子酯甲和五味子酚等。具有抗肝炎、抗病毒解毒、抗癌防癌，对神经中枢的抑制作用和提高心智、增强耐力和体质等作用，被广泛用作药品和保健品。因此，深入研究其有效成分，综合开发利用，具有重要的社会效益和经济价值。高速逆流色谱法是一种新型、高效、洁净的分离纯化技术。随着“天然、营养、回归自然”热潮的兴起，在天然产物的分离领域中占据了独特的地位并倍受瞩目。本文以辽宁产五味子为原料，对硅胶层析和逆流色谱联用分离纯化五味子中的木脂素成分的可行性和适宜的条件进行了深入的研究和探讨。到目前为止，使用逆流色谱法分离五味子的报道中，前处理中使用的提取溶剂多为石油醚，因为其极性较小，多以在提取过程中一些极性大的物质没有分离出来。本文针对这种情况，使用95％的乙醇作为提取溶剂，分离出更多的有效物质。 1、使用硅胶层析，分离经95％乙醇提取的五味子粗提物，结果发现，使用石油醚：丙酮(10：1)做为流动相能分离出木脂素粗提物。确立了能同时检测五味子甲素，五味子乙素，五味子酯甲，五味子酚的高效液相条件：甲醇/水(75：25)，流速1.0ml/min，UV=254nm，柱温35℃。 2、以经硅胶层析粗提物为原料，对高速逆流色谱分离纯化五味子中的木脂素的工艺进行深入研究。重点考察了逆流色谱法的溶剂系统，并确定了工艺。研究结果表明：最佳条件为正己烷-甲醇-水(7：6：1，V/V)。上相为固定相，下相为流动相，转速为800r/min，流速为2.0ml/min。分离纯化时间为4h。在这个条件下，1g五味子木脂素粗品经一次高速逆流色谱分离得到122mg纯度为99.9％的五味子酚，同时分离得到86mg纯度为98％的五味子甲素、93mg纯度为97％的五味子乙素和114mg纯度为99％的五味子酯甲。其中五味子酚是首次使用逆流色谱分离得到。 3、相比于前人在用逆流分离五味子一次分离2种有效物质，第一次经一次逆流色谱分离得到了4种活性木脂素成分。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章绪论

1.1前言

1.2五味子中木脂素成分药理研究和分离纯化手段

1.2.1五味子概述

1.2.2五味子木脂素的药理作用

1.2.3五味子木脂素成分的提取与分离

1.3逆流色谱

1.3.1高速逆流色谱简介

1.3.2高速逆流色谱仪

1.3.3 HSCCC原理

1.3.4 HSCCC特点

1.3.5 HSCCC的溶剂系统及其选择

1.3.6影响因素

1.3.7 HSCCC新进展

1.4五味子分离物的鉴定-质谱法

1.4.1质谱简介

1.4.2质谱仪

1.4.3电喷雾离子化质谱技术

1.4.4电喷雾质谱的解释

1.5中草药指纹图谱的研究现状

1.5.1指纹图谱的概念

1.5.2指纹图谱的建立

1.5.3指纹图谱的解析

1.5.4指纹图谱面临的问题及未来

1.5选题依据

1.6小结

第二章同时测定五味子中四种化合物的HPLC条件

2.1前言

2.2实验部分

2.2.1实验仪器

2.2.2实验材料和试剂

2.2.3实验方法

2.3结果与讨论

2.3.1检测波长的选择

2.3.2柱温、流速和流动相比例的选择

2.3.3线性范围与检出限

2.3.4稳定性及重现性试验

2.4小结

第三章五味子中活性成分的提取方法研究

3.1前言

3.2实验部分

3.2.1实验仪器

3.2.2实验材料和试剂

3.2.3实验方法

3.3结果与讨论

3.3.1选定高浓度乙醇作为提取溶剂

3.3.2提取工艺的选择

3.3.3验证实验

3.4小结

第四章硅胶层析预分离五味子提取物

4.1前言

4.2实验部分

4.2.1实验仪器、材料和试剂

4.2.2实验方法

4.3实验结果与讨论

4.3.1硅胶层析流动相的选择

4.3.2硅胶柱层析分离木脂素

4.3.3硅胶层析分离结果

4.4小结

第五章逆流色谱分离木脂素粗品

5.1前言

5.2实验部分

5.2.1实验仪器

5.2.2实验材料和试剂

5.3实验方法

5.4实验结果与讨论

5.4.1高速逆流(HSCCC)溶剂体系的选择

5.4.2半制备HSCCC分离纯化五味子木脂素

5.4.3分离物的鉴定

5.5小结

第六章后续研究和展望

第七章结论

参考文献

致谢

研究成果及发表的学术论文

作者与导师简历