声明
英文缩略表
第1章 绪论
1.1.1 AS概述
1.1.2 AS的发展过程
1.1.3 巨噬细胞在AS中的作用
1.2.1 MKP家族及其成员
1.2.2 MKP家族成员与疾病关系
1.2.3 MKP7研究现状
第2章 材料与方法
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验细胞
2.1.3 质粒
2.1.4 实验试剂
2.1.5 实验耗材
2.1.6 实验仪器
2.1.7 qPCR引物
2.1.8 主要试剂配制
2.2.1 分离小鼠原代腹腔巨噬细胞
2.2.2 RAW264.7和HEK-293T细胞培养
2.2.3 构建MKP7稳定过表达RAW264.7细胞系
2.2.4 MKP7过表达逆转录病毒的包装与细胞处理
2.2.5 干扰MKP7表达慢病毒的包装和细胞处理
2.2.6 CCK8法检测细胞活力
2.2.7 油红O染色
2.2.8 实时荧光定量PCR实验
2.2.9 蛋白质免疫印迹实验
2.2.10 总胆固醇检测
2.2.11 游离胆固醇检测
2.2.12 Transwell实验
2.2.13 巨噬细胞吞噬功能检测
2.2.14 ROS生成实验
2.2.15 LDH检测
2.2.16 统计学分析
第3章 结果与分析
3.1.1 ox-LDL抑制RAW264.7细胞活力
3.1.2 ox-LDL诱导RAW264.7细胞中MKP7蛋白表达增加
3.2 干扰MKP7表达抑制巨噬细胞泡沫化
3.2.1 干扰MKP7表达抑制巨噬细胞内脂质沉积
3.2.2 沉默MKP7表达对巨噬细胞中脂质代谢的影响
3.2.3 干扰MKP7表达抑制巨噬细胞摄取ox-LDL
3.2.4 干扰MKP7表达抑制RAW264.7细胞内清道夫受体表达
3.2.5 沉默MKP7表达改善了巨噬细胞迁移能力减弱
3.3 沉默MKP7表达抑制原代腹腔巨噬细胞泡沫细胞形成
3.4.1 构建MKP7稳定过表达RAW264.7细胞系
3.4.2 MKP7过表达促进RAW264.7细胞内脂质沉积
3.4.3 MKP7过表达促进RAW264.7细胞清道夫受体表达增加
3.4.4 MKP7过表达促进巨噬细胞迁移能力减弱
3.5 MKP7对ox-LDL诱导的巨噬细胞焦亡的影响
3.5.1 抑制MKP7表达降低了原代腹腔巨噬细胞中LDH的释放
3.5.2 抑制MKP7表达抑制了原代腹腔巨噬细胞内ROS生成增加
3.5.3 沉默MKP7表达抑制原代腹腔巨噬细胞焦亡
3.5.4 MKP7过表达促进原代腹腔巨噬细胞焦亡
第4章 讨论
4.1 MKP7促进巨噬细胞泡沫化
4.2 MKP7促进巨噬细胞焦亡
第5章 结论与创新点
5.1 结论
5.2 创新点
参考文献
作者简介及攻读硕士期间学术成果
致谢
吉林大学;
