甘薯茎尖分生组织培养基的优化及快繁技术研究

摘要

甘薯茎尖培养基的筛选是脱毒苗生产的关键,目前国际上通用的脱毒方法是采用带有1~2个叶原基茎尖分生组织进行培养。但茎尖的大小和脱毒率成负相关,和成活率成正相关。而且,由于试管苗比较脆弱,试管苗的质量成为影响移栽成活率的主要因素之一。本研究用甘薯茎尖为外植体,以提高甘薯茎尖成苗率和试管苗移栽成活率为目的,通过正交设计的方法,研究其培养的最佳不同激素配比的培养基配方,并初步研究了渗透胁迫与营养胁迫对甘薯试管苗抗逆性的影响,结果表明:　　1、通过正交试验和极差分析筛选出适合甘薯茎尖分生组织培养的不同激素配比的培养基配方1 mg/L BA+0.5 mg/L NAA,并进行不同基因型甘薯品种验证,成苗率高达85％;通过回归分析,愈伤一次成苗率最高的培养基配方为:MS+1.48 mg/L BA+0.5 mg/L GA3+1 mg/L IAA+0.5 mg/L NAA。　　2、研究了试管苗在45天时和移栽到温室内一个月之后的形态指标变化。甘薯试管苗在蔗糖(30~90g/l)处理下,叶面积、茎重、叶绿素都高于对照;SOD、POD的活性比对照明显增加。蔗糖浓度为75g/l时,成活率最高为94.7,显著高于对照。　　3、PEG处理,叶片数、根重都比对照多,株高却低于对照;CAT活性降低, MDA含量、可溶性蛋白含量升高。PEG(0~60g/l)处理会使南薯88成活率降低。　　4、CaCl2(0~9g/l)处理中,叶片数、株高、主根、根长都低于对照;SOD活性降低,POD、CAT活性升高,MDA含量下降。CaCl2浓度为3g/l时,成活率最高为100%,高于对照,差异极显著。　　5、在甘露醇(0~60g/l)处理实验中,株高、根长、茎重、叶面积均低于对照,甘露醇浓度为30g/l时,成活率最高,高达96.3%,显著高于对照。　　6、减量MS处理,株高、根长低于对照,茎重、叶面积高于对照;CAT活性低于对照。半量培养基成活率最高,高达93%,高于对照,差异极显著。

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第1章 文献综述

1.1甘薯背景概况

1.1.1 甘薯的形态特征

1.1.2 甘薯的生产现状

1.1.3 甘薯的用途

1.2甘薯病毒病及茎尖分生组织培养的研究进展

1.3甘薯茎尖培养外源激素的研究进展及作用效果分析

1.3.1 6-BA

1.3.2 赤霉素

1.3.3 IAA

1.3.4 NAA

1.3.5植物生长调节物质与内源激素间的作用关系

1.4渗透调节物质与试管苗抗逆性的关系

1.4.1试管苗移栽后易死亡的原因

1.4.2 提高试管苗移栽成活率的技术和措施

1.4.3蔗糖处理与试管苗的抗逆性

1.4.4 PEG处理与试管苗的抗逆性

1.4.5氯化钙处理与试管苗的抗逆性

1.4.6甘露醇处理与试管苗的抗逆性

1.4.7 减量MS处理与试管苗的抗逆性

1.5本研究的目的和意义

第2章甘薯茎尖分生组织培养基的优化

2.1材料和方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果与分析

2.2.1试验结果

2.2.2出愈率、成苗率的分析

2.2.3回归分析

2.2.4各指标的相关性分析

2.2.5不同基因型甘薯品种试验的验证

2.3讨论与结论

2.3.1不同激素配比对出苗率的影响

2.3.2产生丛生芽的不同激素配比

第3章 提高移栽前甘薯抗逆性的研究

3.1材料和方法

3.1.1材料

3.1.2试管苗培养

3.1.3移栽环境条件

3.1.4实验设计处理

3.1.5测定指标与方法

3.2结果与分析

3.2.1蔗糖处理的结果

3.2.2 PEG处理的结果

3.2.3氯化钙处理的结果

3.2.4甘露醇处理的结果

3.2.5 MS减量处理的结果

3.3讨论与结论

3.3.1蔗糖处理对南薯88试管苗移栽成活率的影响

3.3.2 PEG处理对南薯88试管苗移栽成活率的影响

3.3.3 CaCl2处理对南薯88试管苗移栽成活率的影响

3.3.4甘露醇处理对南薯88试管苗移栽成活率的影响

3.3.5 减量MS处理对南薯88试管苗移栽成活率的影响

3.3.6 不同处理的组合对试管苗移栽成活率的影响

第4章甘薯茎尖培养及移栽成苗优化方案

参考文献

附录

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