基于“筋骨并重”理论探讨续断对兔前交叉韧带重建术后腱-骨愈合的影响

摘要

目的：在中医“筋骨并重”理论指导下，通过建立兔前交叉韧带重建术后模型来研究补肝肾中药续断在兔前交叉韧带重建术后腱骨愈合转归中的影响，探讨补肝肾中药续断对其腱骨愈合的作用机制，为其在临床上的应用提供理论依据。　　方法：用40只健康成年雄性新西兰大白兔模拟左膝前交叉韧带断裂后重建模型，并选取32只造模成功的模型进行实验，采用随机数字表法随机分为4组，即空白对照组、低剂量续断组、中剂量续断组及高剂量续断组，每组8只，以中医“筋骨并重”理论为指导，通过生理盐水、低、中、高剂量补肝肾中药续断进行灌胃干预，分别在第4周、第8周每组各处死4只兔子，处死动物前观察所有兔子的一般情况，抽所有兔子的耳缘静脉血进行生化检查分析血钙、血碱性磷酸酶浓度；Micro-CT扫描所有兔子左膝关节，计算分析骨隧道面积及骨隧道周围平均CT值；以及处死模型的股骨及胫骨隧道内口周围组织情况；并用游标卡尺测量股骨隧道内口直径，计算股骨隧道内口扩大率；其中每组处死模型各取1只制作组织学切片，进行HE染色、在光镜下观察Sharpey样纤维的形成及分布情况；每组处死模型各取3只制作成股骨-移植肌腱-胫骨标本，进行生物力学测试，观察记录行拉伸试验时重建韧带完全断裂或脱出时的极限抗拉负荷；最后与空白对照组进行对比并进行统计学分析。　　结果：所有实验家兔均进行左膝关节前交叉韧带断裂重建造模，其中造模过程中1只兔子死于麻醉，3只兔子造模失败，其余均完成造模。造模后的所有实验过程未出现家兔死亡。总体上，造模术后第4周和第8周低、中、高剂量续断组在一般情况、大体观察、股骨隧道内口扩大率、血钙及血碱性磷酸酶浓度、骨隧道面积、骨隧道周围平均CT值、极限抗拉负荷均优于空白对照组，其中高剂量续断组情况最佳，中剂量续断组次之，空白对照组相对最差；而且在第4周和第8周HE染色组织学观察上，低、中、高剂量续断组在腱骨结合处比空白对照模型的Sharpey样胶原纤维及成纤维细胞生长活跃，增殖明显，成骨化高，高剂量续断组情况相比之下最优；造模术后第4周和第8周对4组标本的资料进行统计学分析，结果显示：⑴兔膝前交叉韧带重建术后第4周，4组的血钙浓度进相互比较差异具有统计学意义（ F=214.823， P=0.000<0.05）；4组的血碱性磷酸酶浓度相互比较差异具有统计学意义（F=231.660， P=0.000<0.05）；4组的骨隧道面积比较，除低剂量续断组和空白对照组（P=0.210>0.05），其它各组相互比较差异具有统计学意义（F=213.030，P=0.000<0.05）；4组的胫骨横状位骨隧道周围平均CT值相互比较差异具有统计学意义（F=128.852， P=0.000<0.05）；4组的股骨隧道内口扩大率相互比较，除低剂量续断组和空白对照组（P=0.219>0.05），其它各组相互比较差异具有统计学意义（F=43.371，P=0.000<0.05）；4组标本的第4周的极限抗拉负荷量相互比较差异具有统计学意义（ F=109.802， P=0.000<0.05）。⑵兔膝前交叉韧带重建术后第8周，4组标本的血钙浓度相互比较差异具有统计学意义（F=69.489，P=0.000<0.05）；4组标本的血碱性磷酸酶浓度相互比较差异具有统计学意义（F=65.796，P=0.000<0.05）；4组标本的骨隧道面积相互比较差异具有统计学意义（F=74.589，P=0.000<0.05）；4组标本的胫骨横状位骨隧道周围平均CT值相互比较差异具有统计学意义（F=75.548，P=0.000<0.05）；4组标本的股骨头内口扩大率相互比较差异具有统计学意义（F=73.222，P=0.000<0.05）；4组标本的第8周的极限抗拉负荷相互比较差异具有统计学意义（F=77.134，P=0.000<0.05）。　　结论：在膝关节前交叉韧带重建术后，中药续断在腱骨愈合方面具有积极正面的作用，在促进成骨、提高骨小梁数量、减少骨小梁间隙、提高骨密度、促进腱骨结合处成纤维细胞及Sharpey样胶原纤维增殖、增强腱骨愈合强度等方面具有重要意义，而且与浓度剂量成一定正相关性。

目录

声明

中英文对照表

前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

结果

1 模型一般状况

2 血清生化分析

3 影像学观察

4 大体观察

5 组织学观察

6 生物力学测试

讨论

1 祖国医学的认识

2 实验过程分析

3 实验结果分析

4 问题与展望

结论

致谢

参考文献

附录

附录1 造模过程图片

附录2 中药续断及灌胃图片

附录3 标本采集图片

附录4 病理切片第4周（HE染色，×200，5μm）

附录4 病理切片第8周（HE染色，×200，5μm）

附录5 生物力学测试图片

附录6 文献综述:促进前交叉韧带重建后腱骨愈合方法的研究进展

附录7 在校期间论文论著和科研情况