诺帝-褐藻酸钠微球治疗兔VX2肝癌的实验研究

摘要

目的:　　探讨携带诺帝的褐藻酸钠微球（kelpmierogelation，KMG）即诺帝-KMG对兔VX2肝癌疗效的影响。　　方法:　　选择50只健康新西兰大白兔，采用开腹直接种植法制作VX2肝癌模型。　　1.介入治疗:2周后行上腹部增强CT扫描，确定肝癌模型建立成功后，将50只实验兔随机平均分为五组行介入治疗:生理盐水组（灌注生理盐水1ml/kg）、TACE组(灌注KMG1mg/kg+5-Fu1mg/kg)、 TA(Z)KMG组（灌注KMG1 mg/kg）、诺帝组（灌注诺帝1mg/kg）、诺帝-KMG组（灌注诺帝-KMG1 mg/kg）。　　2.治疗后观察:术后观察实验兔的一般情况;术前1d及术后1d、3d、7d检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肌酐(Cr)水平的动态变化;术前1d及术后7d、14d分别行上腹部增强CT扫描，观察兔VX2肝癌的CT表现，测量肿瘤最大直径和最小直径，计算肿瘤体积增长率，观察各组瘤灶的血供、坏死及转移情况，计算各组转移率;术后14d处死实验兔，选取肿瘤非坏死区及邻近肝组织用4％甲醛固定、包埋、切片，行HE染色观察肝癌术后镜下表现，行免疫组化染色观察肝癌术后血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor，VEGF)的表达及肿瘤微血管密度(microvessel density，MVD)的生成。　　结果:　　1.一般情况5组实验兔术后均有不同程度的精神萎靡、反应迟钝、活动减低、纳差等表现，尤以TACE组、KMG组和诺帝-KMG组明显。　　2.肝肾功能 TACE组、KMG组和诺帝-KMG组术后1d、3d血清ALT、AST显著升高，组间无明显差异(P＞0.05)，但是与生理盐水组、诺帝组相比有显著性差异(P=0.00)，7d后基本降至术前水平;各组血清Cr变化不大，相互间无统计学差异（P＞0.05）。　　3.影像学表现兔VX2肝癌在CT平扫上表现为类圆形低密度影，增强扫描时呈环状强化，中心呈低密度;介入治疗前DSA动脉期表现为肿瘤血管增多、增粗、迂曲，部分呈典型“抱球样”改变，实质期可见肿瘤呈“结节样”染色，栓塞后大部分肿瘤染色减退;术后14d肿瘤体积增长率TACE组（131.82±47.90％）、KMG组（176.76±36.94％）和诺帝-KMG组（118.10±31.64％）均小于生理盐水组（460.94±112.14％）、诺帝组（388.00±98.83％），差异具有统计学意义(P＜0.05);术后14d肿瘤转移率TACE组(29.6％)、KMG组(40％)和诺帝-KMG组(22.2％)均小于生理盐水组(88.9％)、诺帝组(80.0％)。　　4.病理学表现 HE染色镜下可见肿瘤细胞核增大、异型明显、排列紊乱，瘤组织中央大片变性、坏死、结构不清;免疫组化显示各组VEGF蛋白水平各有差异，阳性率分别为:70％、70％、80％、60％及50％，MVD分别为55.45±6.16、63.17±6.42、64.59±7.68、54.53±6.23及44.67±8.22; VEGF在诺帝-KMG组阳性表达细胞中占总细胞比率最低，KMG组阳性表达率最高;诺帝-KMG组MVD最低，与TACE组、KMG组相比，差异有统计学意义(P=0.00)，生理盐水组与诺帝组MVD相比，差异无统计学意义（P=0.16），TACE组与KMG组MVD相比，差异无统计学意义(P=0.72)。　　结论:　　1.诺帝-KMG是一种安全有效、毒副作用低的载药微球，在抗肿瘤治疗中具有广阔应用前景;　　2.诺帝-KMG能明显抑制肿瘤生长，降低肿瘤复发、转移率;　　3.诺帝-KMG能明显抑制肿瘤的血管生成。

目录

摘要

前言

材料与方法

1．实验动物及瘤株

2．主要试剂

3．主要实验设备

4．实验方法

5．统计学分析

结果

1．生物安全性

2．影像学表现

3．病理学表现

讨论

1．肿瘤血管生成

2．改良股动脉穿刺插管

3．诺帝

4．KMG

5．诺帝-KMG

6．本研究的不足及展望

结论

参考文献

附图

英汉缩略词对照表

致谢

肿瘤血管构筑表型的研究进展

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