尤文肉瘤中microRNA--206靶向KHSRP调控肿瘤细胞增殖侵袭迁移的机制研究

摘要

尤文肉瘤(Ewing's sarcoma，ES)，主要以小圆形细胞为特征，是儿童和青少年好发的第二常见的原发性恶性骨肿瘤，其进展迅速，具有较高的侵袭性转移潜能。虽然近几十年来对ES的诊断和治疗（包括辅助化疗、放射治疗和手术治疗）有了极大的努力，但由于局部和转移患者的5年无病生存率分别低于70％和30％，ES目前报道预后仍然很差。因此，为了开发新的诊断和制定更详尽的治疗目标的临床策略，如何能更好地了解尤文肉瘤的致癌机制则是重中之重。　　目前越来越多的研究表明，microRNAs在许多肿瘤（包括肾癌，乳腺癌和肺癌等）的发生发展中，既可以起原癌基因，亦可以起抑癌基因的作用。但是以往的研究中关于microRNA-206在尤文肉瘤中的作用仍不为人所知。此次的研究通过qPCR和WB分别从分子和蛋白水平验证了microRNA-206在ES组织中的表达明显下调，并通过统计学分析其与患者的不良生存率相关。此外，细胞功能实验则表明microRNA-206的过度表达抑制了ES细胞的增殖、侵袭和迁移。这些结果均证实microRNA-206对尤文肉瘤的发生与发展具有抑制作用。　　最近，发现蛋白分子KHSRP(也称为KSRP)是一种可以控制细胞功能如增殖、代谢和对感染因子的反应的分子引文。到目前为止，许多人已经进行了实验来研究KHSRP在各种癌症中的关键作用。而首先通过双荧光素酶实验证明了microRNA-206是通过直接与KHSRP的3'UTR结合来抑制KHSRP分子的表达。此外，microRNA-206显示与ES组织中的KHSRP表达呈负相关。KHSRP敲除抑制了ES细胞增殖，迁移和侵袭。因此，这些结果均可证明KHSRP在由microRNA-206调节的尤文肉瘤细胞的肿瘤进展中有关键的作用。此外，上调KHSRP的表达可以逆转microRNA-206过表达对ES细胞增殖，迁移和侵袭的细胞功能影响。总之，这些发现可能给大家提供对尤文肉瘤中microRNA-206/KHSRP轴的新见解。　　总之，发现microRNA-206在ES细胞和组织中的表达降低，而表达的下调则与预后不良有关。之后的功能实验也表明过表达microRNA-206抑制ES细胞的增殖、迁移和侵袭。我们的研究结果表明microRNA-206在ES组织和细胞中的表达均呈下降趋势。它的下调和上调与恶性的临床特征有关，据此可以预测患者的不良生存率。此外，microRNA-206通过直接与KHSRP的3'UTR结合，抑制了ES细胞的增殖、迁移和侵袭。细胞实验结果研究表明microRNA-206通过靶向KHSRP抑制ES的进展。综上所述，在ES中发现了一个新的microRNA-206-KHSRP轴。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

第一部分microRNA-206在尤文肉瘤组织低表达及患者生存预后差

一、材料与方法

二、结果

三、讨论

第二部分在细胞水平microRNA-206抑制尤文肉瘤的增殖、侵袭、迁移

一、材料与方法

二、结果

三、讨论

第三部分micro-206通过靶向KHSRP抑制尤文肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移

一、材料与方法

二、结果

三、讨论

全文总结

参考文献

综述

在读期间发表论文和参加科研工作情况说明

致谢