声明
摘要
第一篇 蓖麻毒素A链和核糖体蛋白P2相互作用的研究
1.1 核糖体失活蛋白简介
1.2 核糖体失活蛋白ricin
1.3 核糖体stalk蛋白
1.4 核糖体失活蛋白和核糖体stalk蛋白相互作用的研究
1.5 Ricin和核糖体stalk蛋白相互作用的研究现状
第2章 实验过程
2.1 基因克隆及质粒构建
2.2 重组蛋白的表达及纯化
2.3 晶体的生长
2.4 衍射数据的收集及处理
2.5 结构解析和模型修正
2.6 结构模型的质量分析
2.7 Pull-down实验
2.8 等温滴定微量热实验
2.9 RTA抑制核糖体合成蛋白质活性的测定
2.10 圆二色谱分析
第3章 实验结果与讨论
3.2 Linker对结构的影响
3.3 晶体堆积对结构的影响
3.4 RTA和C10-P2相互作用界面的分析
3.5 RTA与P2相互作用界面影响RTA抑制核糖体合成蛋白质的活性
3.6 DDDM花样对RTA和C10-P2相互作用界面的影响
3.7 RTA与TCS识别P蛋白模型的比较
本篇小结
参考文献
第二篇 金黄色葡萄球菌中毒性调控因子Rot的结构生物学研究
4.1 金黄色葡萄球菌简介
4.2 SarA及其家族蛋白
4.3 Rot调控因子
第5章 实验过程
5.1 基因克隆及质粒构建
5.2 重组蛋白的表达及纯化
5.3 晶体的生长
5.4 衍射数据的收集及处理
5.5 结构解析和模型修正
5.6 结构模型的质量分析
5.7 Rot-dsDNA复合物的尝试
5.8 荧光偏振分析
5.9 分子排阻层析
5.10 Rot敲除菌株的回补及western blot检测
第6章 实验结果与讨论
6.1 整体结构
6.2 Rot结合dsDNA的特性
6.3 Rot结合dsDNA的作用界面分析
6.4 Rot二体作用界面的分析
6.5 Rot对α-toxin表达的抑制作用分析
6.6 Rot与SarA家族蛋白的比较
本篇小结
参考文献
第三篇 金黄色葡萄球菌中SaeRDBD的结构生物学研究
第7章 综述
7.2 SaeR/S双组份调节系统
7.3 SaeR转录调控因子
第8章 实验过程
8.1 基因克隆及质粒构建
8.2 重组蛋白的表达及纯化
8.3 晶体的生长
8.4 衍射数据的收集及处理
8.5 结构解析和模型修正
8.6 结构模型的质量分析
8.7 凝胶迁移分析
8.8 圆二色谱分析
8.9 分子排阻层析
8.10 SaeR敲除菌株的回补及α-toxin的检测
第9章 实验结果与讨论
9.1 SaeRDBD整体结构
9.2 SaeR和SaeRDBD结合dsDNA特性的分析
9.3 SaeR和dsDNA相互作用界面的分析
9.4 SaeR正调控α-toxin的表达
9.5 SaeRDBD识别dsDNA可能的机制
本篇小结
参考文献
附录
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果
中国科学技术大学;