声明
论文说明
摘要
绪论
文献综述
1我国肥料使用及土地耕作现状
1.1化肥的过量使用造成耕作环境污染
1.2连作造成土壤肥力下降
2我国“两减”政策
3有机肥的使用现状
4绿肥
4.1绿肥为作物提供养分
4.2绿肥对土壤理化性状的影响
4.3绿肥对土壤微生物学性状的影响
4.4豆科绿肥的特点
4.5绿肥应用中存在的问题
5间套作耕作方式的应用
6本文工作下的研究目的及意义
7研究内容及技术路线
第一章豆科植物根瘤菌的分离筛选
2.1供试材料
2.2培养基与培养条件
2.3实验耗材
2.4实验试剂
3实验方法
3.1根际土壤中根瘤菌的分离
3.2植株根瘤中根瘤菌的分离
3.3不同菌株的总DNA提取
3.416S rRNA基因扩增
3.5植株种植及接种根瘤菌
3.6植株根瘤固氮酶活性的检测
3.7植株的生物量测定
4.1菌种形态
4.216S rRNA测序比对结果
4.3紫云英根瘤菌固氮酶活性以及植株生物量测定
4.4苜蓿根瘤菌固氮酶活性以及生物量测定
4.5苕子根瘤菌固氮酶活性以及生物量测定
4.6菌株种属多样性分析
5小结与讨论
第二章间套作系统的优化筛选及盆栽验证
1前言
2.1供试材料
2.2培养基与培养条件
3.2重组质粒电击转化进入DH5α感受态
3.3根瘤菌感受态细胞的制备
3.4重组质粒电转进入紫云英根瘤菌中
4植物根系分泌物对根瘤菌结瘤能力的影响
4.1 β-半乳糖苷酶活性的测定
4.2植物根系分泌物的提取
5.1盆栽实验设计
5.2操作方法
6实验结果
6.1 lacZ翻译融合质粒的构建
6.2植物根系分泌物不同组份对Mh93结瘤基因表达的影响
6.3盆栽植物生长测定
7小结与讨论
第三章豆科绿肥-茶叶间作的田间应用
2.2供试品
2.3试验设计
3实验方法
3.1播种方法
3.2土壤样品采集
3.3土壤全氮的测定
3.4土壤有机质SOM的测定
3.5土壤碳氮比的测定
3.6土壤酸碱度的测定
3.7土壤微生物多样性测定
3.8茶叶品质检测
4实验结果
4.1土壤总氮的测定
4.2土壤有机质SOM的测定
4.3土壤碳氮比的测定
4.4土壤酸碱度的测定
4.5土壤微生物多样性测定
4.6不同时期的茶叶品质检测
5小结与讨论
全文总结
本文创新点
参考文献
附录
致谢
南京农业大学;