基于寡聚核苷酸FISH的簇毛麦核型构建及普通小麦--簇毛麦6VL染色体结构变异体创制与鉴定

目录

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摘要

缩略词表

第一章文献综述

1、小麦基因源及其在小麦遗传改良中的应用

1．1小麦一级基因库的利用

1．2小麦二级基因库的利用

1．3小麦三级基因库的利用

2、植物染色体鉴定技术

2．1有丝分裂中期染色体制片技术

2．2染色体分带技术

2．3DNA分子原位杂交技术

2．4麦类基因组特异重复序列的克隆和利用

2．5寡聚核苷酸探针及寡聚核苷酸FISH

3、利用分子标记技术鉴定小麦背景中外源染色体

3．1SSR标记

3．2EST标记

3．4IT标记

4、簇毛麦研究现状

4．1簇毛麦染色体核型

4．2小麦-簇毛麦异染色体系创制、鉴定和利用

5、本研究目的和意义

第二章基于寡聚核苷酸探针的簇毛麦FISH核型构建

1、材料与方法

1．1实验材料

1．2簇毛麦根尖细胞有丝分裂中期同步化

1．3根尖细胞有丝分裂中期染色体制片

1．4簇毛麦oligo探针pDvAfa的开发

1．5荧光原位杂交

1．6荧光信号的洗脱

2．结果与分析

2．1簇毛麦重复序列pDvAfa的与寡聚核苷酸探针oligo-pDvAfa的设计

2．2基于三个探针pDvAfa，oligo-pDvAfa及oligo-pAs1的簇毛麦品系91C43的FISH核型

2．3寡聚探针oligo-pSc119．2、(AAC)10及(GAA)10在簇毛麦91C43染色体上的FISH信号的分布比较

2．4利用不同寡聚核苷酸探针组合的FISH核型识别簇毛麦染色体

2．55个簇毛麦不同品系的FISH核型比较

3．讨论

第三章普通小麦-簇毛麦6VL染色体结构变异体的创制与鉴定

1．材料与方法

1．1材料

1．2引物的设计与合成

1．3利用CS ph1b突变体诱导普通小麦-簇毛麦6VL染色体结构变异体

1．4利用普通小麦-簇毛麦T6AS·6VL整臂易位花粉辐射和成熟雌配子辐射创制6VL染色体结构变异体

1．5根尖细胞有丝分裂中期同步化

1．6根尖细胞有丝分裂中期染色体制片

1．7小麦叶片基因组DNA(gDNA)提取

1．8gDNA的探针标记及荧光原位杂交

1．9PCR反应及产物检测

2结果与分析

2．1簇毛麦6VL染色体特异EST-PCR分子标记的开发和筛选

2．2利用CS ph1b突变体诱导普通小麦-簇毛麦6VL染色体结构变异体

2．2利用T6AS·6VL整臂易位电离辐射诱导6VL染色体结构变异体

2．3簇毛麦6VL染色体物理图谱的构建

3．讨论

全文结论

主要创新点和不足之处

参考文献

附录

在读期间发表的论文

致谢