葡萄灰霉病相关VaJAZ9互作蛋白筛选及转化‘无核白’葡萄的研究

目录

声明

第一章 文献综述

1.1葡萄与葡萄灰霉病

1.2茉莉素与茉莉素信号通路

1.3 JAZ蛋白的发现与其作用机制

1.4 JAZ蛋白的结构特点

1.5.1 JAZ蛋白与植物生长发育

1.5.2 JAZ蛋白与植物次生代谢物的合成

1.5.3 JAZ蛋白与非生物胁迫

1.5.4 JAZ蛋白与生物胁迫

1.6 本研究的目的和意义

第二章 材料与方法

2.1材料

2.1.1 植物材料

2.1.2 载体与菌株

2.1.3 主要试剂

2.1.4 主要仪器设备

2.1.5 所用引物

2.2试验方法

2.2.1葡萄灰霉菌的接种与激素处理

2.2.2葡萄RNA的提取及定量PCR分析

2.2.3 VaJAZ9基因的克隆

2.2.4生物信息学分析

2.2.5 VaJAZ9基因启动子的克隆与序列分析

2.2.6亚细胞定位

2.2.7酵母双杂交诱饵载体的构建

2.2.8转录激活活性检测

2.2.9酵母双杂交筛选互作蛋白

2.2.10VaJAZ9和 VaRGA在酵母中互作的回复验证

2.2.11 VaJAZ9基因过表达载体的构建

2.2.12VaJAZ9基因 CRISPR/Cas9编辑载体构建

2.2.13转基因材料的获得

2.2.14农杆菌介导无核白葡萄的遗传转化

2.2.15数据统计与分析

第三章 结果与分析

3.1 VaJAZ9 基因的克隆与生物信息学分析

3.2 VaJAZ9 基因的表达分析

3.2.1 VaJAZ9在外源激素处理和生物胁迫下的表达分析

3.2.2 VaJAZ9的组织特异性表达分析

3.3 VaJAZ9 基因启动子的克隆与分析

3.4 VaJAZ9的亚细胞定位分析

3.5 VaJAZ9互作蛋白的筛选与验证

3.5.1 VaJAZ9基因酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活检测

3.5.2 VaJAZ9互作蛋白的筛选

3.5.3 互作蛋白在酵母细胞中的验证

3.6.1 VaJAZ9基因超量表达载体构建

3.6.2 VvJAZ9基因CRISPR/Cas9编辑载体构建

3.6.3 转基因材料的获得

3.6.4 农杆菌介导的无核白葡萄的遗传转化

3.7讨论

第四章 结论

参考文献

致谢

作者简介