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小麦感条锈病过程中TaSTP3和TaSTP6的功能及调控机理研究

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第一章 文献综述

1.1 植物病原真菌

1.1.1 植物病原真菌分类

1.1.2 活体营养型的小麦条锈菌

1.2.1 吸器

1.2.2 真菌糖转运蛋白

1.2.3 蔗糖酶

1.3 植物己糖转运蛋白

1.3.1 植物单糖转运蛋白基因家族

1.3.2 己糖转运蛋白结构和性质

1.3.3 植物己糖转运蛋白的时空表达特性

1.3.4 植物己糖转运蛋白基本生物学功能

1.3.5 植物己糖转运蛋白参与生物和非生物胁迫

1.4 启动子

1.4.1 启动子结构

1.4.2 顺式作用元件

1.4.3 启动子类型

1.5 WRKY转录因子

1.5.1 WRKY结构与分类

1.5.2 DNA结合位点W-box

1.5.3 WRKY转录因子调控机制

1.5.4 WRKY蛋白在生物与非生物胁迫中的功能

1.5.5 调控糖转运蛋白表达的研究概况

1.6 本研究的目的意义

第二章 小麦己糖转运蛋白TaSTPs 基因家族的鉴定

2.1 引言

2.2.1 试验材料

2.2.2 试剂与仪器

2.3.1 小麦基因组中TaSTPs基因的鉴定

2.3.2 系统进化树分析

2.3.3 转录表达分析

2.4.1 小麦TaSTPs基因的鉴定

2.4.2 小麦TaSTPs系统进化分析

2.4.3 小麦TaSTPs转录表达分析

2.5 讨论

第三章 TaWRKY61/TaWRKY82 调控己糖转运蛋白TaSTP3 参与小麦感条锈病

3.1 引言

3.2.1 试验材料

3.2.2 试剂

3.2.3 仪器

3.3 试验方法

3.3.1 小麦RNA样品准备

3.3.2 RNA提取及cDNA合成

3.3.3 qRT-PCR分析

3.3.4 小麦TaSTP3和TaTFs(转录因子)基因的克隆及序列分析

3.3.5 pDR195-TaSTP3载体构建

3.3.6 酵母感受态制备及转化

3.3.7 酵母突变体异源互补TaSTP3的功能验证

3.3.8 亚细胞定位

3.3.9 分析瞬时沉默TaSTP3对条锈菌的影响

3.3.10 构建转基因材料

3.3.11 转基因小麦分子检测

3.3.12 小麦转基因材料的抗锈性鉴定

3.3.13 样品DAB染色及观察

3.3.14 TaSTP3启动子酵母单杂交筛选及验证

3.3.15 双荧光素酶报告系统验证转录调控

3.4试验结果

3.4.1 TaSTP3的序列分析

3.4.2 TaSTP3的表达特征分析

3.4.3 TaSTP3互补己糖转运蛋白缺失突变体

3.4.4 TaSTP3转运葡萄糖功能特性

3.4.5 TaSTP3特异性细胞膜定位

3.4.6 瞬时沉默TaSTP3对条锈菌生长的影响

3.4.7 TaSTP3-RNAi转基因植株限制条锈菌生长

3.4.8 TaSTP3过表达转基因植株促进条锈菌生长

3.4.9 转录因子激活TaSTP3的表达

3.5.1 TaSTP3的生物学功能

3.5.2 TaSTP3起正调控小麦感条锈病的作用

3.5.3 TaSTP3的转录表达由TaTFs调控

第四章 ABA诱导的己糖转运蛋白TaSTP6 促进小麦感条锈病

4.1 引言

4.2.1 试验材料

4.2.2 试剂

4.2.3 仪器

4.3试验方法

4.3.1小麦RNA样品准备

4.3.2 RNA提取及cDNA合成

4.3.3 qRT-PCR分析

4.3.4 小麦TaSTP6基因的克隆及序列分析

4.3.5 小麦TaSTP6基因启动子的克隆及序列分析

4.3.6 TaSTP6转录表达分析

4.3.7 转基因拟南芥GUS酶活测定

4.3.8 小麦叶片ABA含量测定

4.3.9 瞬时沉默TaSTP6

4.3.10 生物量检测

4.3.11 过表达拟南芥及白粉菌接种

4.3.12 过表达拟南芥叶片糖含量测定

4.3.13 TaSTP6的亚细胞定位

4.3.14 TaSTP6的酵母突变体定位

4.3.15 TaSTP6的酵母突变体互补

4.3.16 TaSTP6的形成聚体验证

4.4.1 TaSTP6的序列分析

4.4.2 TaSTP6的表达特征分析

4.4.3 TaSTP6启动子的表达受ABA调控

4.4.4 条锈菌的侵染诱导小麦ABA含量上调

4.4.5 沉默TaSTP6减弱小麦对条锈菌的感病性

4.4.6 组织学观察TaSTP6沉默植物内菌丝生长情况

4.4.7 TaSTP6的过表达促进了拟南芥对白粉菌的感病性

4.4.8 TaSTP6定位于质膜

4.4.9 利用酵母异源表达对TaSTP6进行功能验证

4.4.10 TaSTP6可以形成寡聚物

4.5讨论

4.5.2 TaSTP6可能通过促进源-库的转变而促进小麦对条锈菌的感病性

4.5.3 TaSTP6生物学特性

第五章 全文结论与展望

5.1 全文结论

5.2 展望

参考文献

附录

致谢

个人简历

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著录项

  • 作者

    怀宝玉;

  • 作者单位

    西北农林科技大学;

  • 授予单位 西北农林科技大学;
  • 学科 植物病理学
  • 授予学位 博士
  • 导师姓名 康振生,刘杰;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
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