中国西沙海绵Agelas aff.Nemoechinata二氯甲烷/甲醇部分化学成分及生物活性研究

摘要

海洋动物海绵是近年来海洋天然产物研究的热点生物之一。Agelas属海绵属于多孔动物门(Porifera)，寻常海绵纲(Demospongiae)，Agelasida目，Agelasida科，该属海绵共有41个种，截止到目前，有19个种被国内外的学者研究，其化学成分主要有吡咯类生物碱和二萜类生物碱，并显示出较好的抑菌，抗肿瘤，抗污损等生物活性。我国南海及其岛屿位于北纬4度至北纬22度之间，接近赤道，属于热带海洋性季风气候，海洋生物资源丰富，海洋生物代谢较为旺盛。为寻找活性突出，结构新颖的次级代谢产物，本课题首次对2009年采自南海西沙群岛的海绵Agelas aff.Nemoechinata甲醇提取物二氯甲烷/甲醇部分进行了系统的化学成分以及生物活性研究。　　次级代谢产物分离纯化与结构鉴定利用硅胶薄层色谱，正相色谱，凝胶Sephadex LH-20色谱，ODS反相色谱，中压液相色谱，高效液相色谱等分离方法，从海绵Agelas aff.Nemoechinata甲醇提取物二氯甲烷/甲醇部分分离获得17个化合物，利用核磁共振波谱(NMR)，紫外光谱(UV)，红外光谱(IR)，质谱(MS)，旋光和圆二色谱(CD)等结构鉴定技术，共鉴定出如下13个化合物，其中2个新化合物（料为新化合物），1个新天然产物（*为新天然产物）:Nemoechine F(1**),Nemoechine G(2**),DebromomukanadinB(3*),NemoechineC(4), NemoechineE(5),8'-oxoagelasineD(6), agelasineB(7),2-oxo-agelasineB(8)，2'-oxo-agelasidineC(9)，2-甲酸吡咯负离子(10)，2-甲酰胺吡咯(11)，9-甲基腺嘌呤(12)，尿嘧啶(13)。　　化合物生物活性研究选用HCT-116（人结肠癌细胞），Jurkat（人T淋巴白血病细胞），Hela（人宫颈癌细胞），HepG2(人肝癌细胞)，MCF-7（人乳腺癌细胞），K562（人白血病细胞）和A-549（人肺癌细胞）七种细胞株，运用MTT或SRB法对部分分离得到的化合物进行体外抗肿瘤生物活性研究。选用金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌，运用药敏试验对大多数化合物进行体外抗菌活性实验。结果显示，新化合物2和已知化合物6对Jurkat和Hela细胞分别表现出较弱的抑制活性，化合物2对Jurkat细胞的IC50为17.11μM;化合物6对Hela细胞有较弱的细胞毒活性，IC50为11.438μM;其次所有化合物对金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌，均表现出很弱的抑制作用。　　研究意义本课题对海绵Agelas aff.Nemoechinata二氯甲烷/甲醇部分化学成分及生物活性的研究，丰富了海绵次生代谢产物的数据库，也为南海海洋生物资源的开发提供了重要的依据。

目录

声明

摘要

第一章 引言

第二章 海绵Agelas属化学成分及生物活性研究综述

2．1 海绵Agelas属化学成分及生物活性研究

2．1．1 吡咯类生物碱

2．1．2 萜类生物碱

2．1．3 其他类型化学成分

2．2 小结与讨论

第三章 海绵Agelas aff．Nemoechinata化学成分研究

3．1 实验部分

3．1．1 样品来源及鉴定

3．1．2 实验仪器

3．1．3 实验材料及试剂

3．1．4 二氯甲烷／甲醇部分分离纯化

3．2 本课题分离得到的化合物

3．3 新化合物结构解析

3．3．1 新化合物1 Nemoechine F

3．3．2 新化合物2 Nemoechine G

3．4 化合物的理化数据

3．5 小结与讨论

第四章 海绵Agelas aff．Nemoechinata生物活性研究

4．1 体外生物活性实验

4．1．1 抑菌实验

4．1．2 抗肿瘤细胞实验

4．2 化合物的体外生物活性评价

4．2．1 化合物体外抑菌生物活性评价

4．2．2 化合物体外抗肿瘤生物活性评价

4．3 小结与讨论

参考文献

结论与创新

缩略语注释

附图

致谢

在读期间发表的学术论文及研究成果