壳聚糖-明胶仿生喉软骨生物材料生物相容性及喉软骨原位修复

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引 言

第一章文章综述

1.1 喉软骨结构

1.2 软骨组织工程的高分子材料

1.2.1 壳聚糖

1.2.2 明胶

1.2.3透明质酸

1.3 种子细胞的选取

1.3.1 软骨细胞

1.3.2 干细胞

第二章喉软骨仿生壳聚糖/明胶支架的制备与表征

2.1.1 实验材料

2.1.2 实验仪器

2.2 原位沉析法和冷冻干燥法制备喉软骨仿生支架

2.2.1 喉软骨仿生壳聚糖-明胶支架的制备

2.2.2 制作流程示意图

2.3 形貌表征

2.3.1 宏观形貌表征

2.3.2 微观形貌表征

2.3.4 壳聚糖-明胶支架孔隙率的测定

2.3.5 力学性能测试

2.3.6 壳聚糖-明胶支架溶胀率的测定：

第三章 喉软骨仿生壳聚糖/明胶支架生物相容性以及体内降解实验研究

3.1 兔骨髓间充质干细胞培养及检测

3.1.1 兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells，bMSCs)分离

3.1.2 兔骨髓间充质干细胞的培养

3.1.3 流式细胞术检测MSCs

3.2 兔骨髓间充质干细胞的GFP转染以及生物相容性情况

3.2.2 兔骨髓间充质干细胞在壳聚糖-明胶支架表面增殖情况检测

3.3 壳聚糖-明胶支架兔皮下降解实验

第四章 喉软骨仿生壳聚糖/明胶支架原位修复兔甲状软骨缺损模型实验研究

4.1 负载BMSCs/C4G4复合支架制备

4.2 兔甲状软骨原位修复

4.2.1 实验动物分组

4.2.2 兔甲状软骨缺损模型制备

4.3 再生组织取材及检测

5.1 壳聚糖-明胶支架的宏观形貌

5.2 壳聚糖-明胶支架的SEM形貌

5.3 壳聚糖-明胶支架的孔隙率

5.4 壳聚糖-明胶生物支架的力学性能

5.5 壳聚糖-明胶生物支架溶胀率

5.6 MSCs的培养及流式检测

5.7 支架的细胞相容性检测

5.7.1 bMSCs在不同支架定量增殖情况

5.7.2 bMSCs在不同支架定性增殖情况

5.8 支架皮下降解实验

5.9 动物实验结果

第六章 讨论

第七章 结论

参考文献

在学研究成果

致 谢

附录A 主要试剂配置

附录B 中英文对照