酿酒酵母丙二酸单酰辅酶A传感器的构建及丙二酸单酰辅酶A合成强化

目录

声明

摘要

1 前言

1．1白酒概况

1．2中国白酒的品类和风味物质概述

1．2．1中国白酒的品类

1．2．2白酒的风味物质

1．2．3风味乙基酯概述

1．2．4强化脂肪酸从头合成途径以提高风味乙基酯

1．3丙二酸单酰辅酶A概述

1．3．1检测丙二酸单酰辅酶A的方法的概述

1．3．2检测丙二酸单酰辅酶A的生物传感器的概述

1．3．3酿酒酵母中丙二酸单酰辅酶A合成强化的研究

1．4．1立题背景

1．4．2研究内容

2材料和方法

2．1．1菌株及质粒

2．1．2主要仪器

2．1．3主要试剂

2．1．4主要培养基

2．1．5主要溶液

2．2实验方法

2．2．1引物设计

2．2．2目的片段的获取及纯化

2．2．3重组质粒的构建

2．2．4酵母转化

2．2．6酿酒酵母菌株的荧光检测

3结果与讨论

3．1酿酒酵母中丙二酸单酰辅酶A传感器的建立

3．1．1 PUC57-Gfe及Yep352-THCPFSP质粒的构建

3．1．2 fapO调控下的eGFP单拷贝菌株的构建及荧光检测

3．1．3 fapO调控下的eGFP多拷贝菌株的构建及荧光检测

3．1．4多拷贝fapO-eGFP的基础上单拷贝FapR菌株的荧光检测

3．1．5多拷贝fapO-eGFP的基础上双拷贝FapR菌株的荧光检测

3．1．6各传感器重构菌株的生长性能测定

3．1．7小结

3．2丙二酸单酰辅酶A传感器的验证

3．2．1整合过表达ACC1菌株以验证传感器的应用

3．2．2整合过表达ACC1ser(659，H57)菌株以验证传感器的可用性

3．2．3游离过表达ACC1ser(659，H57)菌株以验证传感器的可用性

3．2．4过表达ACC1／ACC1ser(659，H57)菌株生长性能的测定

3．2．5小结

3．3丙二酸单酰辅酶A合成的强化

3．3．1过表达PMP1以强化丙二酸单酰辅酶A的合成

3．3．2过表达PMP1强化丙二酸单酰辅酶A的合成

3．3．3过表达PMP1／TPI1菌株生长性能的测定

3．3．4小结

4结论

4．1全文总结

4．2论文的创新点

4．3论文的不足之处

5 展望

参考文献

7攻读硕士学位期间发表论文情况

致谢

附录