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体外扩增人脐血有核造血细胞移植与培养人骨髓间充质干细胞共移植对NOD/SCID小鼠早期造血重建的作用

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1、前言

2、材料与方法

3、结果

4、讨论

5、结论

参考文献

附图

附录

致谢

综述 胶血造血干/祖细胞体外扩增及其临床应用

参考文献

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摘要

目的:探讨人脐血部分体外扩增与第三者成人骨髓间充质干细胞共同移植对亚致死量照射的NOD/SCID小鼠早期造血重建的作用,旨在解决单份脐血造血干/祖细胞数量的不足难以满足高体重患者移植的需要以及脐血移植后早期植入延迟,从而拓宽脐血移植临床应用范围。方法:冻存的单份人脐血复苏后,以单只小鼠输注2.0×104个脐血CD34+细胞,即输注1.05×107个脐血有核细胞为最低移植细胞数,其1/4量、1/6量分别在含有SCF、FL、TPO及IL-3的无血清无基质培养基中体外扩增7天。用Ficoll淋巴分离液从第三者成人骨髓中分离出单个核细胞,然后通过离心法和贴壁法富集出间充质干细胞并连续体外培养传代至第3代。单纯CB、扩增CB和MSC以单独或不同联合方式移植于亚致死量(400cGy,200cGy/min)照射后的NOD/SCID小鼠,FCM检测移植后2周小鼠骨髓、脾脏及外周血中的人CD45+、CD34+、CD33+、CD71+和CDl9+细胞的表达,细胞计数仪测定其WBC、RBC、Hb、Plt的含量。结论:1,在无血清无基质培养基和组合细胞因子SCF、FL、TPO及IL-3的作用下,单份CB部分短期体外扩增,可获得较大量的总有核细胞及造血祖细胞,并具有维持其植入的潜能。2,实验表明,脐血部分体外扩增与第三者骨髓MSC共同移植促进早期造血重建,尤其是加快了Plt的早期恢复。

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