褪黑素通过改善血脂、抑制TLR4信号通路和血炎症因子水平影响兔动脉粥样硬化斑块

摘要

目的：探讨褪黑素(Melatonin,MLT)对动脉粥样硬化模型兔血脂、主动脉Toll样受体4(Toll-likereceptor4,TLR4),核转录因子κB(Nucleartranscription factor-κB,NF-κB)、髓样分化因子88(Myeloiddifferentiationfactor88,MyD88)蛋白表达、血炎症因子水平和动脉粥样硬化进展的影响。
　　方法：复制实验性兔动脉粥样硬化模型。普通级新西兰大白兔36只,随机分为3组:正常组、模型组、MLT组。正常组给予普通饲料喂养,模型组给予高胆固醇饲料喂养,MLT组给予高胆固醇饲料加MLT喂养,12周后分别采用酶法检测血清中总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyeride,TG)水平,选择性沉淀法检测低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein-cholesterol,LDL-c),高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein-cholesterol,HDL-c)水平;酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immuno sorbent assay,ELISA)检测血清炎症因子:肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor–α,TNF-a)、高敏C反应蛋白(hypersensitive Creactiveprotein,hs-CRP)水平;石蜡切片HE染色观察主动脉病理形态学变化,测量主动脉内膜厚度、中膜厚度并计算内膜/中膜厚度比;免疫组织化学法和Westernblot法检测兔主动脉TLR4、NF-κB、MyD88蛋白水平。
　　结果：12周高脂喂养成功建立实验性兔动脉粥样硬化模型;与正常组相比,模型组血清中血脂:TC、LDL-c、HDL-c水平明显升高(p<0.01),TG水平也明显升高(p<0.05),血清炎症因子:TNF-α、hs-CRP水平明显升高(p<0.01),内膜与内膜/中膜厚度比明显升高(p<0.01),中膜厚度变化差异无显著性,免疫组织化学法和westernblot均表明动脉中TLR4、NF-κB、MyD88蛋白水平显著升高(p<0.01)。与模型组相比,加喂了褪黑素的MLT组血清血脂TC、LDL-c水平明显下降(p<0.01),TG水平也明显下降(p<0.05),HDL-c水平明显升高(p<0.01),血清炎症因子TNF-α、hs-CRP水平明显下降(p<0.01),内膜厚度、内膜/中膜厚度比明显降低(p<0.05),中膜厚度变化无显著性,免疫组化和westernblot均表明主动脉中TLR4、NF-κB、MyD88蛋白水平降低(p<0.01)。
　　结论：褪黑素可能通过改善血脂、抑制TLR4信号通路和血炎症因子水平抑制实验性兔动脉粥样硬化进展。

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中英文缩略词对照表（Abbreviation）

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英文摘要

1.前言

2.材料与方法

2.1常用仪器

2.2 AS模型的建立

2.3标本收集

2.4血清血脂检测

2.5血清炎症因子的检测

2.6 石蜡切片的制备

2.7 HE染色

2.8免疫组织化学

2.9动脉组织匀浆的制备

2.10 BCA法蛋白定量

2.11 Western blot

3结果

3.1 MLT对兔血清血脂水平的影响

3.2 MLT对兔血清炎症因子水平的影响

3.3 MLT对AS兔主动脉病理形态的影响

4讨论

4.1炎症反应与动脉粥样硬化的关系

4.2 MLT可以抑制TLR4信号通路

4.3 MLT可以抑制血炎症因子水平

4.4 MLT可以降低血脂

5.结论

参考文献

附 录

致谢

综述