药物性肝损伤的临床特点、预后评估及内质网应激在利福平合用异烟肼致大鼠肝损伤中的作用

摘要

目的:
　　(1)总结药物性肝损伤(DILI)的临床特点，探讨评估DILI预后的因素。
　　(2)探讨内质网应激(ERS)在利福平（RFP）合用异烟肼（INH）致大鼠肝损伤中的作用及可能机制。
　　方法:
　　(1)回顾性分析近5年我院DILI的临床资料，运用Logistic回归分析筛选影响预后的指标。
　　(2)将32只SPF级雄性Sprague-Dawley（SD)大鼠随机分成4组，每组8只。正常对照组（N组）：予以等量的生理盐水每日定时空腹灌胃一次；RFP组（R组）：给予RFP50mg2 kg－12 d－1定时空腹灌胃一次；模型组（M组):INH和RFP各50mg2kg－12 d－1定时空腹灌胃一次；PBA组：INH和RFP同M组，再给予4-苯基丁酸（PBA）160mg2kg－12d－1腹腔注射一次；R组和 M组给予等量溶剂腹腔注射。连续14d后处死大鼠。留取大鼠血液和肝脏组织标本。全自动生化分析仪检测大鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素（TBIL)、直接胆红素（DBIL)、谷丙转氨酶（ALT)、谷草转氨酶（AST)、总胆汁酸（TBA)水平。HE染色观察大鼠肝脏病理学改变。免疫印迹法检测大鼠肝脏葡萄糖调节蛋白（GRP78）、P65、IκB及胆盐输出泵（Bsep）蛋白的表达变化。免疫组化法检测Bsep蛋白在大鼠肝细胞中的表达及定位变化。
　　结果:
　　DILI患者女性较多(57.5%)，平均年龄52岁，用药以中药、抗菌类及解热镇痛类为主。肝细胞型DILl多见(81.1％)，严重程度分级中以中度居多（54.7%），91.5%患者预后良好。不同严重程度肝细胞型DILI间Hy's法则符合率不同（P＜0.05），符合此法则的肝细胞型DILI患者肝衰竭的发生率为22.9%（11/48）。多因素回归分析显示：影响DILI预后的指标有ALT(OR=1.672，P=0.026)、国际标准化比值（INR）(OR=8.852，P=0.015)。
　　(2)与N组相比，R组、M组大鼠血清TBIL、DBIL、TBA及ALP均升高（P＜0.05），ALT及AST升高不明显（P＞0.05）；R组大鼠肝脏病理学检查可见肝细胞脂肪变性，M组可见肝细胞脂肪变性程度加重、部分可见炎细胞浸润和点灶状坏死；R组、M组大鼠肝脏中GRP78和P65蛋白的表达量明显上升（P＜0.05），IκB及Bsep蛋白的表达明显下降（P＜0.05）。R组、M组肝胞膜上Bsep的平均积分光密度(IOD)分别为3.56±1.18和2.35±1.18，较正常组（9.63±1.59）下降（P＜0.05），M组肝胞膜上Bsep分布不规则。与M组相比，PBA组大鼠TBIL、DBIL、ALP及TBA均降低（P＜0.05）；肝脏病理学变化亦明显改善；GRP78、P65明显下调，IκB及Bsep明显上调（P＜0.05）；肝胞膜上Bsep的平均IOD值为4.66±1.75，较M组上升（P＜0.05），肝胞膜上Bsep分布较M组规则。
　　结论:
　　(1)DILI患者大部分预后较好。发病时ALT及INR是预测DILI预后的独立指标。
　　(2)RFP可导致胆汁淤积和肝细胞脂肪变性，上调GRP78、P65及下调Bsep、IκB蛋白的表达，减少肝细胞膜上的Bsep并改变其定位。
　　(3)PBA可改善RFP合用INH所致的肝损伤，下调GRP78、P65及上调Bsep、IκB蛋白的表达，改善肝细胞膜上Bsep的表达和定位，提示ERS在RFP合用INH诱导的大鼠肝损伤中发挥重要作用，其可能机制是通过激活NF-κB，抑制Bsep表达和改变Bsep的定位。

目录

声明

中英文词缩略表

（一）：药物性肝损伤的临床特点及其预后评估

1 引言

2 材料与方法

3 结果

4 讨论

（二）：内质网应激在利福平合用异烟肼致大鼠肝损伤中的作用

1 引言

2 材料与方法

3 结果

4 讨论

结论

不足与改进

参考文献

附录

致谢

综述:异烟肼、利福平致肝损伤发病机制的研究进展

附图