鹿瓜多肽、选择性雌激素受体调节剂-雷诺昔酚对绝经后骨质疏松症的药物作用及相关研究

摘要

绝经后骨质疏松症及骨质疏松性骨折已构成威胁绝经后妇女健康主要疾病，以往采用雌激素替代疗法预防和治疗妇女绝经后骨质疏松症，但雌激素替代疗法存在阴道不规则出血、体重增加、乳房痛、子宫内膜增生等副作用，长期应用会增加忠子宫肌瘤、血栓栓塞性疾病、乳腺癌和子宫内膜癌的危险性，这使得应用雌激素防治妇女绝经后骨质疏松受到了影响。研究发现，SERMs对骨组织具有雌激素样骨保护作用，对乳腺和子宫具有拮抗雌激素的作用，在防治绝经后骨质疏松症的同时避免了雌激素对机体产生的不利影响。另外，临床观察发现，鹿瓜多肽注射液具有诱导新骨形成、加快成骨和骨折修复的作用。 为了进一步了解上述两种药物对绝经后骨质疏松的影响及作用机制，我们利用去卵巢大鼠来进行了以下工作：(1).通过观察RAL对去势大鼠骨密度、骨组织形态学、骨生物力学指标的影响，了解RAL对绝经后骨质疏松的药物作用。(2).通过观察RAL对去势大鼠松质骨中TNF-α表达及相关血生化指标的影响，了解RAL对骨吸收作用的影响，并探讨其骨保护机制。(3).通过观察CCP对去卵巢大鼠骨密度及松质骨中BMP2表达的影响，了解CCP对绝经后骨质疏松的作用及其机制。 本研究主要包括以下内容：(1).将30只SD雌性大鼠随机分为SHAM组、OVX组、OVX+RAL组，给予OVX+RAL组大鼠雷诺昔酚、生理盐水悬液灌胃(1mg/kg·d)，其它两组大鼠给予等量生理盐水(3ml/kg/d)灌胃；术后20周处死所有大鼠，心脏采血行血生化指标检测；测量各组大鼠股骨、腰椎骨密度；部分大鼠股骨标本进行骨生物力学指标检测；L2椎体及股骨髁部标本进行组织学观察，并进行骨形态计量学分析；利用免疫组织化学染色及用图象分析方法对各组大鼠松质骨TNF-α表达进行灰度值分析。 (2).将30只SD雌性大鼠随机分为SHAM组、OVX组、OVX+CCP组，给予OVX+CCP组大CCP注射液肌注(0.6ml/kg/d)，其它两组大鼠给予等量生理盐水肌注；术后20周处死所有大鼠，测量各组大鼠股骨、腰椎骨密度，L2椎体及股骨髁部标本进行组织学观察；利用免疫组织化学染色及用图象分析方法对各组大鼠松质骨中BMP2表达进行灰度值分析。 结果：(1).OVX组大鼠皮质骨及松质骨BMD、股骨生物力学指标及骨形态计量学指标较SHAM组显著下降(P＜0.01)，OVX+RAL组大鼠的上述指标明显高于OVX组(P＜0.01)，接近SHAM组水平(P＞0.05)。 (2).OVX组大鼠松质骨中TNFα阳性细胞灰度值(137.89±7.80)较SHAM组(165.17±7.60)明显降低(P＜0.01)，表明去势后大鼠松质骨中TNF-α表达明显增加，TNF-α对骨吸收的刺激作用增强；OVX+RAL组大鼠松质骨中TNFα阳性细胞灰度值(161.70±3.19)高于OVX组(137.89±7.80)(P＜0.01)，表明经RAL治疗的去势大鼠松质骨中TNF-α阳性表达明显减弱。OVX组大鼠血ALP、Ca2+值较SHAM组和OVX+RAL组明显升高(P＜0.01)，而OVX+RAL组血ALP、Ca2+值与SHAM组无显著差别(P＞0.05)，各组血P值无明显差异(P＞0.05)。 (3).OVX+CCP组大鼠各部位BMD明显高于OVX组(P＜0.01)，但与SHAM组仍有明显差别(P＜0.01)；OVX+CCP组较OVX组腰椎小梁相对丰富，骨皮质相对较厚，小梁间隔较小，但未达到SHAM组水平(P＜0.01)。OVX组BMP2阳性灰度值(146.69±2.54)明显低于SHAM组(175.36±3.92)(P＜0.01)，表明去势后大鼠骨组织中BMP2表达增多，骨转换加快；而OVX+CCP组大鼠松质骨中BMP2阳性灰度值(141.20±2.95)较OVX组(146.69±2.54)进一步降低(P＜0.01)，表明OVX+CCP组松质骨中BMP2的表达比OVX组明显增强。 实验得出以下结论(1).RAL能够明显抑制骨质疏松的形成，对维护低雌激素水平情况下机体骨矿含量、骨细微结构及骨生物力学性能具有显著效果。 (2).RAL可抑制去势大鼠松质骨中TNF-α的表达，并对骨质疏松形成过程中的溶骨作用有抑制的作用；表明RAL对TNF-α的抑制作用可能是其抑制绝经后骨质疏松形成的作用机制之一。 (3).CCP可通过上调骨组织中BMP2的表达促进骨形成、延缓去势大鼠骨质疏松的形成。

目录

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缩略语表

前言与文献回顾

实验材料

实验一选择性雌激素受体调节剂—雷诺昔酚对去势后大鼠骨密度、骨组织形态计量学、骨生物力学指标的影响

实验二雷诺昔酚对去势后大鼠血生化指标及松质骨中TNFα表达的影响

实验三CCP对去卵巢大鼠骨密度及松质骨中BMP2表达的影响

小结

参考文献

个人简历及硕士期间所取得的研究成果

致谢

附录