引言
材料与方法
1 实验材料
1.1 实验器材
1.2 配方及试剂
1.3 实验动物
1.4 样本
1.5 数据库网站
2 实验方法
2.1 实验小鼠体重与体长的测量
2.2 基因鉴定
2.3外泌体提取与表观鉴定
2.4 Western blotting鉴定外泌体
2.5总RNA提取
2.6 RNA测序
2.7 样本表达分析
2.8 测序结果分析
2.9 荧光定量PCR验证靶基因表达
2.10 数据处理
结果
1 成功使用琼脂糖凝胶电泳鉴定fat-1基因
2 n-3PUFAs明显抑制了小鼠体重增加和肥胖
3外周血外泌体提取和鉴定成功
4 血浆外泌体总RNA质控结果满足实验需求
5 测序数据质控结果与Small RNA分类注释结果满足实验需求
6 样本内miRNA表达量符合需求
7 高脂饮食fat-1组小鼠具有特异的外泌体miRNA表达谱
8 通过差异表达miRNA-靶基因预测与KEGG分析发现与脂质代谢密切相关的内吞通路
9 深层次筛选显示6个差异表达miRNA的靶基因处于脂肪酸代谢通路的关键位置
10 实时荧光定量PCR验证靶基因表达成功
讨论
结论
参 考 文 献
综述:n-3PUFAs对小鼠外泌体中miRNA的调节和抑制肥胖的作用
综 述 参 考 文 献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢
声明
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