激活的自噬在金黄色葡萄球菌诱导的人鼻黏膜上皮细胞凋亡中的保护作用

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中英文缩略词说明

引言

1 实验材料

1.1金黄色葡萄球菌菌株、细胞株及腺病毒来源

1.2主要实验仪器

1.3主要实验试剂

1.4 主要试剂配制

2 实验方法

2.1 金黄色葡萄球菌菌株培养及标准生长曲线的制备

2.1.1 培养

2.1.2 金葡菌标准曲线

2.1.3 金葡菌冻存

2.2 细胞培养

2.2.1 细胞复苏

2.2.2 细胞传代

2.2.3 细胞计数

2.2.4 细胞冻存

2.3细胞处理

2.3.1 细胞毒性试验

2.3.2 金葡菌感染细胞模型的构建

2.3.3 mRFP-GFP-LC3腺病毒感染复数（MOI）测定

2.4 Western Blot检测相关蛋白的表达

2.4.1 细胞总蛋白的提取

2.4.2 蛋白质凝胶电泳

2.4.3 转膜

2.4.4 封闭

2.4.5 抗体孵育

2.4.6 显影

2.5 Flow Cytometry检测细胞凋亡率

2.6 激光扫描共聚焦显微镜（CLSM)检测细胞凋亡率

2.7 统计方法

3 实验结果

3.1金黄色葡萄球菌标准生长曲线

3.2 金葡菌感染细胞最适宜MOI的测定

3.3 雷帕霉素及巴弗洛霉素预处理HNEpC毒性实验

3.4 mRFP-GFP-LC3 腺病毒感染HNEpC最适宜MOI的测定

3.5 金葡菌诱导HNEpC启动凋亡

3.6 金葡菌诱导HNEpC自噬活性增强

3.7自噬抑制剂预处理阻断自噬流增加HNEpC凋亡

3.8 自噬诱导剂预处理增强自噬减少HNEpC凋亡

4 讨论

5 总结

参考文献

综述:自噬在气道疾病中的研究进展

自噬

自噬与慢性鼻-鼻窦炎

自噬与哮喘

自噬与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

总结

参考文献

个人简历

致谢