声明
中英文缩略词表
引 言
1 实验材料
1.1 细胞系
1.2 主要实验仪器
1.3 主要实验试剂
1.4 主要实验耗材
1.5 主要试剂的配制
1.5.1 药物配制
1.5.2 基本溶液的配制
2 实验方法
2.1 细胞培养
2.1.1 食管鳞癌细胞的复苏
2.1.2 食管鳞癌细胞体外培养和传代
2.1.3 细胞的冻存
2.2 细胞生存率测定实验(DAPI法)
2.3 细胞增殖实验
2.4 软琼脂克隆形成实验
2.5 蛋白质组学质谱的样品准备
2.6 样品蛋白的提取
2.7 胰酶酶解
2.8 液相色谱-质谱联用分析后数据库搜索
2.9 生物信息学分析
2.10 Western blotting 实验
2.10.1 KYSE150 细胞蛋白提取和浓度的测定
2.10.2 配胶及电泳
2.11 实验动物的饲养及小鼠PDX模型的构建
2.11.1 实验动物饲养
2.11.2 小鼠PDX 模型的构建
2.12 免疫组织化学染色
2.13 细胞蛋白下拉试验
2.14 细胞周期
2.15 统计学分析
3 实验结果
3.1 木蝴蝶苷 A 对食管鳞癌细胞生存率和对正常食管上皮细胞毒性的影响
3.2 木蝴蝶苷A对食管鳞癌增殖能力的影响
3.2.1 木蝴蝶苷A 对食管鳞癌细胞增殖的抑制作用
3.2.2 木蝴蝶苷A 对食管鳞癌细胞非锚定依赖生长的影响
3.3 组学质谱实验的流程图和质控分析
3.4 木蝴蝶苷A作用后食管鳞癌细胞中磷酸化蛋白质组学的改变
3.4.1 磷酸化蛋白质组学中差异蛋白和位点
3.4.2 差异磷酸化位点对应蛋白的功能分类和富集
3.4.3 木蝴蝶苷A 处理细胞后下调STAT3Tyr705,STAT3Ser727,NFκB Ser907磷酸化水平
3.5 木蝴蝶苷A在PDX模型中抑制食管鳞癌肿瘤的生长
3.5.1 在体内实验中检测木蝴蝶苷A 对食管鳞癌肿瘤的抑制作用
3.5.2 免疫组织化学实验(IHC)检测验证在组织水平木蝴蝶苷 A 下调STAT3Tyr705,STAT3Ser727,NFκB Ser907的磷酸化水平变化
3.6 木蝴蝶苷A诱导食管鳞癌细胞增殖阻滞在G0/G1期
4 讨论
5 结论
参考文献
综述:黄酮类化合物在癌症研究中的进展
参考文献
个人简历
致 谢
郑州大学;