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【6h】

木蝴蝶苷A对食管鳞癌增殖的抑制作用及其机制的研究

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中英文缩略词表

引 言

1 实验材料

1.1 细胞系

1.2 主要实验仪器

1.3 主要实验试剂

1.4 主要实验耗材

1.5 主要试剂的配制

1.5.1 药物配制

1.5.2 基本溶液的配制

2 实验方法

2.1 细胞培养

2.1.1 食管鳞癌细胞的复苏

2.1.2 食管鳞癌细胞体外培养和传代

2.1.3 细胞的冻存

2.2 细胞生存率测定实验(DAPI法)

2.3 细胞增殖实验

2.4 软琼脂克隆形成实验

2.5 蛋白质组学质谱的样品准备

2.6 样品蛋白的提取

2.7 胰酶酶解

2.8 液相色谱-质谱联用分析后数据库搜索

2.9 生物信息学分析

2.10 Western blotting 实验

2.10.1 KYSE150 细胞蛋白提取和浓度的测定

2.10.2 配胶及电泳

2.11 实验动物的饲养及小鼠PDX模型的构建

2.11.1 实验动物饲养

2.11.2 小鼠PDX 模型的构建

2.12 免疫组织化学染色

2.13 细胞蛋白下拉试验

2.14 细胞周期

2.15 统计学分析

3 实验结果

3.1 木蝴蝶苷 A 对食管鳞癌细胞生存率和对正常食管上皮细胞毒性的影响

3.2 木蝴蝶苷A对食管鳞癌增殖能力的影响

3.2.1 木蝴蝶苷A 对食管鳞癌细胞增殖的抑制作用

3.2.2 木蝴蝶苷A 对食管鳞癌细胞非锚定依赖生长的影响

3.3 组学质谱实验的流程图和质控分析

3.4 木蝴蝶苷A作用后食管鳞癌细胞中磷酸化蛋白质组学的改变

3.4.1 磷酸化蛋白质组学中差异蛋白和位点

3.4.2 差异磷酸化位点对应蛋白的功能分类和富集

3.4.3 木蝴蝶苷A 处理细胞后下调STAT3Tyr705,STAT3Ser727,NFκB Ser907磷酸化水平

3.5 木蝴蝶苷A在PDX模型中抑制食管鳞癌肿瘤的生长

3.5.1 在体内实验中检测木蝴蝶苷A 对食管鳞癌肿瘤的抑制作用

3.5.2 免疫组织化学实验(IHC)检测验证在组织水平木蝴蝶苷 A 下调STAT3Tyr705,STAT3Ser727,NFκB Ser907的磷酸化水平变化

3.6 木蝴蝶苷A诱导食管鳞癌细胞增殖阻滞在G0/G1期

4 讨论

5 结论

参考文献

综述:黄酮类化合物在癌症研究中的进展

参考文献

个人简历

致 谢

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著录项

  • 作者

    鲁冰冰;

  • 作者单位

    郑州大学;

  • 授予单位 郑州大学;
  • 学科 病理学与病理生理学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 刘康栋;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 TQ4R96;
  • 关键词

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