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英文缩略词表
目 录
第一章 绪论
1.1 研究问题的提出
1.2 研究目的及意义
1.3 国内外研究现状
1.3.1 乙酰转移酶-CBP
1.3.2 DNA 损伤修复因子-Ku70
1.3.3 DNA 损伤修复因子-Mre11
1.4 研究思路与方法
1.4.1 研究思路与方法
1.4.2 研究方法
1.5 研究内容
1.6 创新点
第二章由CBP、Ku70、NOX2 组成的基因调控网调节黑素瘤细胞凋亡、副凋亡及坏死
2.1 前言
2.2 实验材料
2.2.1 实验材料
2.2.2 实验试剂
2.2.3 实验仪器
2.3 实验方法
2.3.1 A375 细胞的复苏与冻存
2.3.2 绘制黑色瘤细胞生长曲线
2.3.3 特异性 siRNA 序列的设计与合成
2.3.4 siRNA 的配制与转染
2.3.5 实时荧光定量 PCR 检测基因的表达
2.3.6 Western Blot 检测目的蛋白的表达
2.3.7 CCK-8 检测细胞增殖
2.3.8 流式细胞仪检测细胞凋亡
2.3.9 流式细胞仪检测 ROS
2.3.10 流式细胞仪检测细胞周期
2.3.11 细胞形态学观察
2.3.12 DAPI 染色观察细胞核
2.3.13 统计学分析
2.4 实验结果
2.4.1 敲低 CBP 和/或 Ku70 后抑制 A375 细胞的增殖
2.4.2 敲低 CBP 和/或 Ku70 后 A375 细胞出现不同方式的死亡
2.4.3 敲低 CBP 和/或 Ku70 后 A375 细胞的形态学变化
2.4.4 敲低 CBP 和/或 Ku70 后 A375 细胞的 ROS 变化
2.4.5 敲低 CBP 和/或 Ku70 后增加 A375 细胞中 NOX2 的表达
2.4.6 敲低 CBP 和/或 Ku70 后诱导 A375 细胞核降解
2.4.7 敲低 A375 细胞中 CBP 后通过降低 Ku70 的表达诱导凋亡
2.4.8 敲低 CBP 和/或 Ku70 后诱导 A375 细胞 S 期阻滞
2.5 讨论
第三章 CBP 和Mre11 对人恶性黑色素瘤细胞发展的影响
3.1 前言
3.2 实验材料
3.2.1 实验材料
3.2.2 实验仪器
3.3 实验方法
3.3.1 细胞复苏与冻存
3.3.2 特异性 siRNA 序列的设计与合成
3.3.3 siRNA 的配制与转染
3.3.4 实时荧光定量 PCR 检测目的基因的表达
3.3.5 CCK-8 检测细胞增殖
3.3.6 流式细胞仪检测细胞死亡
3.3.7 流式细胞仪检测细胞周期
3.3.8 DAPI 染色观察细胞核
3.3.9 流式细胞仪检测 ROS
3.3.10 统计学分析
3.4 实验结果
3.4.1 敲低 CBP 和/或 Mre11 后抑制细胞增殖
3.4.2 敲低 CBP 和/或 Mre11 后对 A375 细胞死亡的影响
3.4.3 敲低 CBP 和/或 Mre11 后对 A375 细胞形态学的影响
3.4.4 敲低 CBP 和/或 Mre11 后对 A375 细胞的 ROS 变化
3.4.5 敲低 CBP 和/或 Mre11 后诱导 A375 细胞核降解
3.4.6 敲低 CBP 和/或 Mre11 后对 A375 细胞周期的影响
3.5 讨论
结 论
参考文献
致 谢
攻读硕士期间取得的学术成果
河北大学;
