缩略词表
第一章 文献综述
1.1 引 言
1.2 PD-1/PD-L1受体在骨和软组织肉瘤中的表达情况
1.3 PD-1/PD-L1与骨和软组织肉瘤预后的关系
1.4 PD-1/PD-L1在骨和软组织肉瘤转移中的作用
1.5 常用的PD-1/PD-L1单克隆抗体在在骨和软组织肉瘤中的应用
1.6 基于PD-1/PD-L1的分子影像技术在骨和软组织肉瘤诊疗中的作用
1.7 免疫治疗是晚期骨和软组织肉瘤患者的新希望
第二章：靶向人源化PD-1荷瘤鼠S180肉瘤PD-1受体蛋白单克隆抗体探针的实验研究
2.1 引 言
2.2 主要实验材料
2.2.1 主要实验细胞株及瘤株
2.2.2 主要实验动物
2.2.3 主要仪器与设备
2.2.4 主要实验试剂
2.3 实验方法
2.3.1 natI-JS001的标记
2.3.2 JS001和natI-JS001的平均分子量测定（MALDI-TOF-MS）
2.3.3 ELISA法检测JS001和 natI-JS001与human PD-1受体结合能力（EC50值）的差异
2.3.4 S180细胞株复苏培养及传代
2.3.5 人源化PD-1 C57BL/6小鼠基因测序（肌肉和脾脏）
2.3.6 皮下荷瘤鼠动物模型的建立
2.3.7 放射化学标记
2.3.8 124I-JS001的质量控制
2.3.9 124I-JS001的体外稳定性分析
2.3.10 体外T细胞流式分析
2.3.11 体外T细胞Western Blot
2.3.12 细胞摄取实验及Kd值的测量
2.3.13 131I-JS001的药代动力学和体内生物分布实验
2.3.14 肿瘤组织human PD-1 PCR及电泳实验
2.3.15 肿瘤组织human PD-1 Western Blot实验
2.3.16 Micro-PET/CT成像
2.3.17 HE染色
2.3.18 免疫组化染色
2.3.19 免疫荧光染色
2.3.20 统计学方法
2.4.1 JS001和natI-JS001的平均分子量
2.4.2 JS001和natI-JS001的EC50值
2.4.3 124I-JS001的放射性标记和质量控制
2.4.4 124I-JS001的体外稳定性
2.4.5 体外T细胞亲和力测定
2.4.6 体外T细胞Western Blot
2.4.7 T细胞摄取实验及kd值
2.4.8 人源化的PD-1 C57BL/6小鼠基因测序
2.4.9 肿瘤细胞传代和荷瘤鼠动物模型建立
2.4.10 肿瘤组织hPD-1 PCR and Western Blot.
2.4.11 药物代谢和生物分布
2.4.12 免疫PET成像
2.4.13 病理分析
2.5 讨论
2.6 小结
第三章：靶向荷瘤鼠OS-732骨肉瘤PD-L1受体蛋白HCAb Nb6抗体探针的实验研究
3.1 引 言
3.2 主要实验材料
3.2.1 主要实验细胞株及瘤株
3.2.2 主要实验动物
3.2.3 主要仪器与设备
3.2.4 主要实验试剂
3.3.1 抗PD-L1（ECD）HCAb的产生
3.3.2 稳定转染人PD-L1的A375细胞的构建
3.3.3 Fc融合HCAb Nb6（anti-hPD-L1 Nb6）的构建与表达
3.3.4 natI-anti-hPD-L1 Nb6的标记
3.3.5 Anti-hPD-L1 Nb6和 natI-anti-hPD-L1 Nb6的平均分子量测定
3.3.6 ELISA法检测anti-hPD-L1 Nb6和 natI-anti-hPD-L1 Nb6与human PD-L1受体结合能力（EC50值）的差异
3.3.7 Anti-hPD-L1 Nb6抗体毒性试验
3.3.8 OS-732细胞株复苏培养及传代
3.3.9 皮下荷瘤鼠动物模型的建立
3.3.10放射化学标记
3.3.11 124I-anti-hPD-L1 Nb6的质量控制
3.3.12 124I-anti-hPD-L1 Nb6的体外稳定性分析
3.3.13 体外OS-732骨肉瘤细胞流式分析
3.3.14 体外OS-732骨肉瘤细胞免疫荧光染色
3.3.15 OS-732骨肉瘤细胞摄取实验及Kd值的测量
3.3.16 肿瘤组织human PD-L1 PCR及电泳实验
3.3.17 肿瘤组织human PD-L1 Western Blot实验
3.3.18 124/125I-anti-hPD-L1 Nb6的药代动力学和体内生物分布实验
3.3.19 Micro-PET/CT成像
3.3.20 HE染色
3.3.21 免疫组化染色
3.3.22 免疫荧光染色
3.3.23 统计学方法
3.4 实验结果
3.4.1 hPD-L1免疫噬菌体展示文库的构建及抗hPD-L1 HCAb的筛选与鉴定
3.4.2 建立稳定的hPD-L1过表达的细胞系
3.4.3 通过流式细胞仪筛选具有hPD-L1高亲和力的HCAb
3.4.4 单价HCAb Nb6结合亲和力的测定
3.4.5 人源化HCAb Nb6的生化特性评估
3.4.6 Anti-hPD-L1 Nb6和natI-anti-hPD-L1 Nb6的平均分子量
3.4.7 Anti-hPD-L1 Nb6和natI-anti-hPD-L1 Nb6的EC50值
3.4.8 Anti-hPD-L1 Nb6 抗体毒性试验
3.4.9 124I-anti-hPD-L1 Nb6的放射性标记和质量控制
3.4.10 124I-anti-hPD-L1 Nb6的体外稳定性
3.4.11 OS-732细胞表达hPD-L1的流式测定
3.4.12 OS-732骨肉瘤细胞免疫荧光染色，摄取实验及kd值
3.4.13 肿瘤组织hPD-L1 PCR and Western Blot.
3.4.14 124/125I-anti-hPD-L1 Nb6药物代谢和生物分布
3.4.15 Micro-PET/CT免疫显像
3.4.16 IHC, IF和HE染色
3.5 讨论
3.6 小结
第四章 全文总结
参考文献
附录
致谢
声明
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