声明
第一章 绪论
1.1.2 制糖工业中的α-葡聚糖
1.2 α-葡聚糖酶
1.2.3 α-葡聚糖酶的应用
1.3枯草芽孢杆菌
1.3.1 枯草芽孢杆菌概述
1.3.2 枯草芽孢杆菌表达系统
1.3.3 枯草芽孢杆菌基因组编辑
1.4 本论文的主要研究内容
1.4.1 立题依据和研究意义
1.4.2 本论文主要研究内容
第二章 α-Dextranase 在枯草芽孢杆菌中的游离表达
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 菌株和质粒
2.2.2 本章所用引物
2.2.3 培养基及培养条件
2.2.4 主要实验试剂和仪器
2.2.5 DNA琼脂糖凝胶电泳
2.2.6 SDS-PAGE 凝胶电泳试剂
2.2.7 实验操作
2.2.8 制备与转化大肠杆菌感受态细胞
2.2.9 分析方法
2.3 结果与分析
2.3.1 游离重组表达质粒的构建与转化
2.3.2 α-DEX在枯草芽孢杆菌中的游离表达
2.3.3 α-葡聚糖酶的SDS-PAGE 验证
2.3.4 B. subtilis WB800 重组菌的培养
2.3.5 α-葡聚糖酶的酶活测定
2.3.6 不同碳源对产α-葡聚糖酶影响
2.3.7 不同金属离子对重组菌产酶影响
2.4 本章小结
第三章 α-Dextranase在枯草芽孢杆菌中的食品级表达
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 菌株和质粒
3.2.2 本章所用引物
3.2.3 培养基及培养条件
3.2.4 主要试剂和仪器
3.2.5 实验方法
3.3 结果与分析
3.3.1 克隆载体T-Vector-pMD19-amyE 的构建
3.3.2 构建敲除框
3.3.3 重组菌B. subtilis WB800-p43-DEX的构建
3.3.4 重组菌B. subtilis WB800-p43-DEX的SDS-PAGE 验证
3.3.5 重组菌B. subtilis WB800-p43-DEX的生长曲线
3.4本章小结
第四章 重组α-葡聚糖酶的酶学性质解析
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 菌种及质粒
4.2.2 试剂和仪器
4.2.3 酶活测定
4.2.4 分析方法
4.3 结果与分析
4.3.2 底物浓度对α-DEX 酶活力的影响
4.3.4 α-DEX酶活力的温度稳定性
4.3.5 金属离子对α-DEX 酶活力的影响
4.3.6 不同分子量底物对α-DEX酶活力的影响
4.4 本章小结
第五章 结论与创新点
5.1 结论
5.2 创新点
5.2 展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
附录
广西大学;
